活菌中药微生态制剂对断奶仔猪和雏鸡喂养效果的研究
（哈尔滨中科生物工程有限公司 韩丽男）
摘要：本实验选用45 日龄健康长白断乳仔猪60 头，随机分为四组，每组15 头，a、b、c 组分别为活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组、活菌中药微生态制剂“开口菌”治疗组和土霉素治疗组，d 组为空白对照组；选用一日龄公雏鸡200 只，随机分为四组，每组50 只，a、b、c 组分别为活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组、活菌中药微生态制剂“开口菌”治疗组、环丙沙星治疗组，d 组为对空白照组。实验结果表明： 仔猪饲喂活菌中药微生态制剂“开口菌”可有效预防猪霍乱沙门氏菌性肠炎，且对已感染仔猪的治愈率达100％，3 个处理组的末均重和日增重与对照组相比都有显著差异（p＜0.01）。雏鸡饲喂活菌中药微生态制剂“开口菌”能有效降低鸡白痢发病数，且对b 组中50 只发病雏鸡的治愈率达到94%。3 个处理组的末均重和日增重与对照组相比都达到极显著差异（p＜0.05）。说明活菌中药微生态制剂“开口菌”可显著提高动物生长速度，防病治病，减少死亡率。
关键词：活菌、中药、微生态制剂、断奶仔猪、雏鸡、喂养效果
近年来，由于严重的在畜禽日粮中大量不规范使用抗菌促生长药物，致使畜禽产品中有不同程度的药残，从而严重影响到人们的身体健康。随着进入二十一世纪，畜产品的无害化将更迫切，特别是利用活菌中药微生态制剂等绿色添加剂来代替或减少畜禽日粮中常规使用的各种抗生素与促生长添加剂已成为饲料业的研究热点。因此，能够替代抗生素、抗菌药物而又无毒副作用无残留的活菌中药微生态制剂正被广大养殖户所认可。
在养猪生产中，断奶仔猪发生腹泻是影响其生产的一大难题。断奶仔猪由于其消化系统、免疫功能不够完善，抵抗细菌的能力较差，易被病原微生物侵袭而出现消化不良、下痢、体弱、生长缓慢，饲料报酬低等问题。病原性细菌如大肠杆菌K88、猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌是引起仔猪发生腹泻的主要病原菌，常给养猪生产带来极大的损失。雏鸡白痢是由鸡白痢沙门氏杆菌引起的严重危害雏鸡及育成鸡的一种细菌性传染病，给养鸡业带来极大的经济损失。但随着临床诊断上抗菌药物的不断增多，以及滥用抗生素造成的禽肉和禽蛋产品中药物残留对人类健康地影响，促使人们研究应用生物防治方法控制雏鸡白痢。
因此，研究活菌微生态制剂防治仔猪肠道肠道传染病和雏鸡白痢，对于促进仔猪和雏鸡健康成长，提高生产性能具有现实的和重要的意义，并且为活菌中药制剂的研制开发提供了必要的理论与实践依据。
活菌中药微生态制剂又称第四代益生素，该系列产品由哈尔滨中科生物工程有限公司于2002年首创研发，活菌中药微生态制剂采用活性乳酸菌、双歧杆菌等有益菌种对精选中药进行发酵，并使用特殊包装工艺进行包装，既保持了乳酸菌的活性，又提高中药功效4-28倍。主要产品有“开口菌”、“猪源康”、“冠菌道”、“肠速康”、“本草倍利康”、“母源康”、“保禽肽”等。大家购买时一定要认清厂家和品牌，市场上目前出现许多干粉制剂，由于生产时需要经过高温，活菌都变成死菌，出售时却宣传是活性乳酸菌，使用后一点效果也没有。使用活菌中药微生态制剂按治疗剂量进行拌料或饮水，可以迅速控制由各种原因引起的腹泻，连续使用3天，不仅见效快（24小时见效），而且以其高效、广谱、绿色无公害、无药残等特点被广大养殖户所认可。
1 实验材料和方法
1.1 活菌中药微生态制剂“开口菌”
由哈尔滨中科生物工程有限公司研制，以活性乳酸菌对精选中药进行发酵经特殊生产工艺进行特殊包装。内含乳酸杆菌， 有效活菌数在10×10^8个/克以上；双歧杆菌，有效活菌数5×10^8个/克；中药发酵提取物（黄连、黄岑、苦参、金银花、白头翁、秦皮）；生物多糖、生物碱、复合有机酸、生物抗菌肽、苷类、蒽醌类及其还原衍生物、免疫调节因子、各种消化酶等。
1.2 试验动物
健康长白断乳仔猪60 头，45 日龄，体重15-20 kg，未经猪沙门氏菌菌苗免疫，购自山东省临沂市郯城县某种猪场。
一日龄公雏鸡200 只，体重38-40 g，未经鸡白痢沙门氏杆菌菌苗免疫，购自山东省德州市某种鸡场。
1.3 基础日粮
仔猪基础日粮配方见表1-1。
表 1-1 仔猪基础日粮配方
|
原料 |
配比/% |
主要营养成分 |
指标 |
|
玉米 |
56.0 |
消化能 |
3442.0 |
|
豆粕 |
15.0 |
粗蛋白/% |
18.5 |
|
膨化豆粕 |
10.0 |
钙/% |
0.7 |
|
进口豆粕 |
6.0 |
有效磷/% |
0.36 |
|
乳清粉 |
8.0 |
赖氨酸/% |
1.15 |
|
添加剂 |
5.0 |
粗脂肪/% |
5.62 |
|
|
|
粗纤维/% |
2.56 |
|
|
|
钠/% |
0.17 |
|
合计 |
100 |
氯/% |
0.15 |
雏鸡以全价颗粒饲料饲喂，由连云港正大饲料有限公司生产。
1.4 供试菌株
猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleeraesuis），由南京农业大学动物科技学院预防兽医学教研组提供。
鸡白痢沙门氏杆菌（Salmonella Pullorum），由南京农业大学动物科技学院预防兽医学教研组提供。
1.5 试验药品及培养基
⑴ 土霉素：石家庄市华曙制药厂生产，批号0601336，全检合格，按照使用说明使用。
⑵ 环丙沙星：珠海市国茂生物科技有限公司生产，批号190402159，全检合格，按照使用说明使用。
（3）SS 琼脂培养基
月示胨 5 g，牛肉膏5 g，乳糖10 g，琼脂15~20 g，胆盐(No.3)3.5 g，枸橼酸钠8.5 g， 硫代硫酸钠8.5 g，枸橼酸铁1 g，1% 中性红溶液2.5 mL，0.1 % 煌绿溶液0.33 mL，蒸馏水1 L。
将上述成分(除中性红、煌绿外)混合于水中，加热煮沸溶解，调节pH 至7.0-7.1，然后加入中性红和煌绿溶液，充分混匀冷却至50℃时倾注平板。
（4）麦康凯琼脂培养基
蛋白胨17 g，月示胨3 g，猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5 g，氯化钠5 g，琼脂17 g，蒸馏水1 000 mL，乳糖10 g，0.01 %结晶紫水溶液10 mL，0.5 %中性红水溶液5 mL。
1.6 实验方法
1.6.1 动物分组及试验设计
（1）60 头猪随机分为4 组，每组15 头，a、b、c 组分别为活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组，活菌中药微生态制剂“开口菌”治疗组和土霉素治疗组，d 组为不用药空白对照组。采用猪霍乱沙门氏菌人工感染猪复制肠炎病例，活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组a 用量按实际饮水用量计算，“开口菌”500ml每瓶兑水500kg，治疗组b 饮水量按实际饮水用量计算，“开口菌”500ml每瓶兑水250kg.
（2）将雏鸡随机分成4 组，每组50 只。a、b、c 组分别为活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组，活菌中药微生态制剂“开口菌”治疗组，环丙沙星治疗组，d 组为对照组，不饲喂活菌中药微生态制剂。采用鸡白痢沙门氏杆菌人工感染鸡白痢病例，活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组：用量按实际饮水用量计算，“开口菌”500ml每瓶兑水500kg； 活菌中药微生态制剂“开口菌”治疗组：用量按实际饮水用量计算，“开口菌”500ml每瓶兑水250kg；环丙沙星药物对照组用量为0.75-1.25g·L^-1 水。
1.6.2 人工感染试验
（1）将猪霍乱沙门氏菌接种血液营养琼脂平板，37℃培养24 h，挑取典型单个菌落接种营养肉汤培养基中，37℃培养24 h，测其菌落形成单位（cfu）后将肉汤培养物稀释为含活菌1.0×10^9cfu·mL-1。4 组口服接种猪霍乱沙门氏菌液3mL·头-1（3.0×10^9 cfu·mL-1）。
（2）将鸡白痢沙门氏杆菌接种于沙门氏杆菌增菌肉汤培养液中，37 ℃培养24 h 后转接于新鲜血液琼脂平板上，37℃下再培养24 h，用生理盐水洗下菌苔，平板稀释培养法计算活菌数。攻毒时，给雏鸡一次经口滴喂约6×10^9 cfu·ml^-1 活菌。
1.6.3 给药及临床观察
（1）购回2 日后，预防组按每只猪每日正常饮水量计算所需的活菌中药微生态制剂“开口菌”的用量， 将每组给药量加入饮水中，全天量集中2小时饮用，每日饲喂1次，连用5 d。之后给所有对照人工感染猪霍乱沙门氏菌，感染后72 h 开始对b、c 试验组用活菌中药微生态制剂“开口菌”和土霉素治疗。投药后每天观察猪精神、食欲和粪便情况，并记录。猪投药5 d 后计算治愈率(治愈率＝治愈猪数/试验猪数×100％)，50 d 称重。对死亡猪及时采肝脏病料，进行猪霍乱沙门氏菌的分离培养与鉴定。
（2） 从2 日龄开始，预防组每日饮用活菌中药微生态制剂“开口菌”，连用5天。在5 日龄时，给所有雏鸡滴喂鸡白痢沙门氏杆菌，待第2、3 组鸡开始发病时，分别用活菌中药微生态制剂“开口菌”和环丙沙星予以治疗。每日纪录各组发病及死亡情况。30 日龄时计算雏鸡死亡率、存活率及每羽平均增重。对死亡鸡及时采肝脏病料，进行鸡白痢沙门氏杆菌的分离培养与鉴定。
1.6.4 饲养方法
（1）各组猪隔离饲养，饲喂不含任何抗菌药物的猪全价饲料，并供给充足的符合饮用水标准的自来水（给“开口菌”或药除外）。
（2）所有雏鸡均采用网上笼养，任其自由采食和饮水（给“开口菌”或药除外）。
2 实验结果与分析
2.1 仔猪临床状况观察
2.1.1 对照组猪人工感染情况
人工感染后72 h 后空白对照组猪出现排稀便现象，随后出现精神萎顿，食欲减退，饮欲增加，排黄绿色稀粪，感染后5-8 d 先后d组有5 头猪死亡，对病死猪剖检发现小肠、结肠黏膜和盲肠粘膜充血，有出血，2 头死猪出现纤维素性肠炎和腹膜炎。感染后10 d 猪开始逐渐恢复正常。
2.1.2 试验组预防及治疗情况
在 50 d 的试验期内，各试验组的预防及治疗情况见表2-1。表 2-1 活菌中药微生态制剂“开口菌”及土霉素对猪肠炎的疗效
|
组别 |
试验猪数/ 头 |
发病猪数/头 |
死亡数/ 头 |
死亡率/% |
7 天治愈数/头 |
治愈率/% |
存 活率/% |
|
a |
15 |
0 |
0 |
0 |
|
|
100 |
|
b |
15 |
15 |
0 |
0 |
15 |
100 |
100 |
|
c |
15 |
15 |
1 |
6.7 |
13 |
86.7 |
93.3 |
|
d |
15 |
15 |
5 |
33.3 |
|
|
66.7 |
从表2-1 可以看出，预防组中，活菌中药微生态制剂“开口菌”按预防用量即每瓶500ml兑水500kg使用，对猪霍乱沙门氏菌性肠炎有很好预防效果，猪群没有发病，存活率达到100%；治疗组中，活菌中药微生态制剂“开口菌”按治疗量即每瓶500ml兑水250kg使用，对猪霍乱沙门氏菌性肠炎效果很好，发病的15 头猪中无一头死亡，7 天全部治愈，治愈率达100％，比对照土霉素粉组的效果还要好，而且见效更快， 说明此活菌中药微生态制剂“开口菌”完全可替代土霉素用于猪霍乱沙门氏菌性肠炎的预防和治疗。
2.1.3 病料细菌鉴定结果
对发病死亡的仔猪进行细菌分离鉴定结果均为猪霍乱沙门氏杆菌。
2.1.4 仔猪增重情况
表 2-2 仔猪增重情况
|
组别 |
实验猪数/头 |
始均重/kg |
末均重/kg |
日增重/kg |
|
a |
15 |
15.75±1.5 |
39.52±2.6 |
0.476 |
|
b |
15 |
15.50±1.25 |
39.91±3.0 |
0.488 |
|
c |
15 |
15.35±1.25 |
38.13±2.2 |
0.457 |
|
d |
15 |
15.80±1.5 |
33.65±3.1 |
0.357 |
从表 2-2 可以看出，与对照组相比，活菌中药微生态制剂0.“开口菌”预防组的平均日增重提高33.3%、治疗组提高36.7%、环丙沙星治疗组提高28%；3 个处理组的末均重和日增重都有极显著差异（p＜0.01）。
2.2 雏鸡临床状况观察
2.2.1 对照组雏鸡人工感染情况
人工感染后对照组在接种后24 h 约半数雏鸡出现精神不振，羽毛蓬松，食欲差，42 h 出现拉稀，第5-6 d 为死亡高峰期，10 d 后未见死亡，但生长不良，有的鸡肛门粘有粪块。
2.2.2 试验组预防及治疗情况
在 30 d 试验期内，各组雏鸡预防及治疗情况表2-3。
表 2-3 活菌中药微生态制剂“开口菌”及环丙沙星对鸡白痢的疗效
|
组别 |
试验鸡数/ 只 |
发病鸡数/ 只 |
死亡数/ 只 |
死亡率/% |
治愈鸡数/只 |
治 愈 率/% |
存 活率/% |
|
a |
50 |
2 |
1 |
2 |
1 |
|
98 |
|
b |
50 |
50 |
3 |
6 |
47 |
94 |
94 |
|
c |
50 |
50 |
3 |
6 |
47 |
94 |
94 |
|
d |
50 |
50 |
20 |
40 |
|
|
60 |
从表 2-3 可以看出，饲喂活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组中，发病鸡数仅为2只，一只自愈，一只死亡，存活率可达98%；治疗组中发病的50 只雏鸡，死亡3 只，治愈47只，治愈率达到94%，与环丙沙星治疗组疗效相当。可见，雏鸡早期饲喂活菌中药微生态制剂对雏鸡白痢很好的预防和治疗作用，其治疗效果相当理想，可完全替代环丙沙星作为雏鸡白痢沙门氏菌的治疗药物。
2.2.3 病料细菌鉴定结果
对发病死亡的雏鸡进行细菌分离鉴定结果均为沙门氏杆菌。
2.2.4 雏鸡增重情况
30 日龄时各组雏鸡平均体重及增重见表2-4
表2-4 雏鸡增重情况
|
组别 |
实验鸡数/头 |
始均重/g |
末均重/g |
日增重/g |
|
a |
50 |
38.52±2.6 |
178.80±8.8 |
4.676 |
|
b |
50 |
38.91±3.0 |
169.10±10.1 |
4.340 |
|
c |
50 |
39.13±2.2 |
171.79±12.8 |
4.422 |
|
d |
50 |
38.65±3.1 |
136.25±13.1 |
3.253 |
从表 2-4 可以看出，与对照组相比，活菌中药微生态制剂“开口菌”预防组的平均日增重提高43.7%、治疗组提高33.4%、环丙沙星治疗组提高35.9%；3 个处理组的末均重和日增重都达到极显著差异（p＜0.01）。
3 结论
⑴ 活菌中药微生态制剂“开口菌”按预防用量（每瓶兑水500kg）使用，对猪霍乱沙门氏菌性肠炎有较好的预防效果；按治疗用量（每瓶兑水250kg）饮用，对猪霍乱沙门氏菌性肠炎效果很好，治愈率达100％，比对照药品土霉素的效果还要好，见效还快。因此，此活菌中药微生态制剂“开口菌”可用于猪肠炎的防治。从仔猪的增重情况来看，预防组、活菌中药微生态制剂治疗组和土霉素治疗组的增重都明显高于对照组。原因可能是生长早期的仔畜由于胃酸分泌不足，胃中pH 值高，抑制了胃蛋白酶的活性，而乳酸杆菌有利于改善胃内环境，降低pH 值，激活胃蛋白酶，还可产生较强的酶来降解饲料中复杂的碳水化合物。
（2）雏鸡早期饲喂活菌中药微生态制剂按预防用量（每瓶兑水500kg)能预防鸡白痢，保护雏鸡免遭鸡白痢沙门氏杆菌的感染，减少雏鸡死亡，提高育雏成活率。另外，活菌中药微生态制剂“开口菌”对雏鸡白痢还有很好的治疗作用。当按治疗量（每瓶兑水250kg)添加时，治愈率可达94%，可完全替代常用抗生素环丙沙星。从雏鸡增重情况来看，在饲喂微生态制剂后遭鸡白痢沙门氏杆菌攻击的情况下， 雏鸡的增重仍明显高于对照组。原因可能是活菌中药微生态制剂“开口菌”中的活性乳酸菌在雏鸡消化道迅速繁殖，成为肠道优势菌，抑制了鸡白痢沙门氏杆菌感染，并通过产生各种酶类，有利于动物对营养物质的吸收， 从而促进动物的生长。
动物喂养实验表明，活菌中药微生态制剂“开口菌”在动物养殖中的可显著提高动物生长速度和增重，防病治病，改善饲料利用率和减少死亡率。
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