鸡嗜血杆菌（Haemophilus gallinarum）呈多形性。在初分离时为一种革兰氏阴性的小球杆菌，两极染色，不形成芽胞，无荚膜无鞭毛，不能运动。24小时的培养物，菌体为杆状或球杆状，大小为0.4～0.8um×1.0～3.0um，并有成丝的倾向。培养48～60h后发生退化，出现碎片和不规则的形态，此时将其移到新鲜培养基上可恢复典型的杆状或球杆状状态。
本菌为兼性厌氧，在含10％的大气条件下生长较好。对营养的需求较高，早期的报告认为既需要X因子[氯高铁血红素（hemin）]，也需要V因子[烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)]。但是，近来的分离菌株已证明只需要V因子。鲜血琼脂或巧克力琼脂可满足本菌的营养需求。
经24h培养后，在琼脂表面形成细小、柔嫩、透明的针尖状小菌落，不溶血。本菌可在血琼脂平板每周继代移植保存，但多在30～40次继代移植后失去毒力。有些细菌，如葡萄球菌在生长过程中可排出V因子。因此，副鸡嗜血杆菌在葡萄球菌菌落附近可长出一种卫星菌落。若把副鸡嗜血杆菌均匀涂布在2％示胨琼脂平板上，再用葡萄球菌作一直线接种，则在接种线的这缘有副鸡嗜血杆菌生长，这可作为一种简单的初步鉴定。若用含5%～10％鸡血清的糖发酵管，可测定本菌的生化特性。
本菌的抵抗力很弱，培养基上的细菌在4℃时能存活两周，在自然环境中数小时即死。对热及消毒药也很敏感，在45℃存活不过6min，在真空冻干条件下可以保存10年。
