鸡瘟病如何诊断? 鸡瘟又称禽流行性感冒、真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是鸡类、禽鸟的一类烈性传染病。该病的诊断除流行病学、临床症状、病理变化外,必须结合病毒学和血清学检查来确诊。
(1) 病毒分离和鉴定:以无菌棉拭吸取死鸡或病鸡呼吸追窦渗出物或组织(包括血液),制成无菌悬液接种10-11日龄鸡胚,收集死胚尿囊液和羊水,与鸡红细胞作红细胞凝集试验,检查是否存在红细胞凝集素。当测定红细胞凝集素证实为流感病毒后,再用补体结合试验来确定病毒的型别。
(2) 血清学检查:方法有红细胞凝集试验、红细胞凝集仰制试验、病毒中和试验和琼脂扩散试验等。开展疫情普查,多采用琼脂扩散试验,具体方法为:① 琼脂板的制备:PH6.4 0.01MPBS液配制:甲液:NaHPO4?12H2O 3.58克蒸馏水 100毫升乙液:KH2PO4 1.36克 蒸馏水 100毫升待甲乙二液充分溶解后,用脱脂棉过滤后分别保存.用时取甲液24毫升,乙液76毫升混合即可。制板:琼脂糖0.6克,氯化钠8克加入甲乙混合液至100毫升,在水浴中充分煮沸融化后,加入0.01%的硫柳汞.每个平皿分装18-20毫升,待凝固后,放普通冰箱保存备用.打孔:从冰箱取出立即按7孔梅花图形打孔,孔眼4毫米,孔距3毫米,将孔中的琼脂轻轻挑出,若有松动,可轻轻加温封底.② 加样和结果观察。用带有6-7号针头的注射器或滴管,吸取抗原悬液滴入中间孔中以加满为止,阳性对照血清分别加入外周的1、4孔中,受检血清按顺序分别加入4个外周孔中,每加一个样品应更换一个针头。加样完毕后放入温箱,待抗原及血清渗入琼脂中后,将平皿倒直过来,放保持一定湿度的瓷盘中,以24-48小时观察结果。如果受检血清有禽流感抗体,则在抗原和抗体孔中之间产生肉眼可见的清晰、致密的沉淀线,沉淀线的一端必须和阳性对照血清沉淀线一端相吻合,即为阳性,不出现沉淀线的为阴性反应。阳性血清的沉淀线一端弯向被检孔时,此孔的被检样品为弱阳性反应。有的受检样品产生1条以上的沉淀线,仍属阳性反应。