1 发病情况 南宁市某猪场存栏母猪126头,2004年6月热冷交替时发生以高热、咳嗽、呼吸困难、流产或产死胎为特征的急性传染病。不论年龄猪均发生高热;中后期母猪流产、产死胎,共记48头(窝)发生流产或产死胎,占怀孕母猪的70%。仔猪死亡52头,占存栏仔猪的14.2%。笔者通过对典型病例的解剖和实验室诊断,综合诊断为猪胸膜肺炎放线杆菌、附红细胞体和繁殖呼吸综合征病毒混和感染。
2 临床症状 不同年龄猪都表现持续高热,食欲不振,体温40.5~41.5℃,鼻孔有清涕,呼吸困难,咳,喘气,无腹泻,使用抗生素和退烧药治疗效果不明显,血虫净治疗有一定效果;仔猪咳、喘气较严重,个别发生痉挛性干咳,呈犬坐式,腹式呼吸,鼻尖发蓝,耳尖和边缘青紫,皮肤苍白;发病率为20%,死亡率为15%左右,仔猪在病后4~7死亡率高;怀孕母猪发烧后2~3天流产,产出仔猪1~3天整窝死亡或产死胎,流产率达70%。公猪和育肥猪表现体温升高,食欲不振,没有死亡。
3 病理变化 现场剖检3头仔猪,主要表现为:可视黏膜苍白,全身淋巴结肿大,肺门淋巴结肿大、出血,肺尖叶、膈叶、心叶肉变,整个肺部水肿、气肿、有出血点,切面流出带泡沫液体,呈红白相间的花斑状;脾脏表面凹凸不平;肾脏变软。
4 实验室诊断
4.1 猪胸膜肺炎放线杆菌的分离和鉴定 无菌取濒死仔猪的肺、脾、淋巴组织接种到加有5%健康兔血的脑心汤中,置于温室或烛缸中37℃培养24 h增菌,培养液经抹片、革兰氏染色,发现阴性、丝状的细菌,菌液转接到兔血琼脂上,37℃、24 h培养后,有灰色、圆形、半透明的菌落,革兰氏染色,发现单个或成双排列的阴性杆菌。生化鉴定:氧化酶、过氧化酶阳性,0.1%美蓝牛奶、七叶苷、马尿酸阳性;能利用木糖、蔗糖;不利用甘露醇、山梨醇;麦康凯培养基上能生长。37℃培养24 h的菌液,腹腔注射30 g体重的小鼠(每只0.2 ml)2只,24 h死1只、另1只注射5天后死亡。剖检死亡小鼠发现:肺出血、脾和肾肿大,肝和肾有脓肿点等病变。
4.2 猪附红细胞体的检验 取发烧期病猪耳静脉血滴于载玻片上,加生理盐水稀释加盖玻片,油镜观察,在红细胞表面、边缘及血浆中可见到圆形或卵圆形的附红细胞体。另取发烧期病猪耳静脉血注射到小鼠腹腔内,24小时后采尾静脉血压片镜检均发现附红细胞体。
4.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒检测 RT-PCR反应,在3个组织样品中均扩增出519p特异性条带,说明该患猪已经感染猪繁殖呼吸综合征病毒。
5 防治
5.1 猪放线杆菌能引起仔猪发烧,喘气,鼻炎,耳尖发紫;断奶猪厌食,发烧,持续性咳嗽,呼吸急促和肺炎;母猪出现子宫炎和流产。猪附红细胞体病表现为耳廊边缘、尾以及四肢的末端发绀,母猪出现繁殖障碍;而猪繁殖呼吸综合征主要以仔猪严重呼吸道疾病、母猪繁殖障碍为特征。本文通过病原学的检测确诊了这3种疾病呈混合感染:分离出猪放线杆菌、检测到鉴定猪附红细胞体和RT-PCR检测猪繁殖呼吸综合征病毒。该猪场没有使用过猪繁殖与呼吸综合征疫苗。同时,我们也进行了猪瘟(RT-PCR)、伪狂犬病(PCR)的检测,结果两者都为阴性。从流行病学特征来分析,本次疫病的流行仔猪死亡率并不高,主要表现呼吸症状和流产、死胎或产弱仔等繁殖障碍。因此,可以认为本次疫病的流行是以猪繁殖呼吸综合征和猪放线杆菌病为主,伴发猪附红细胞体病。
5.2 根据猪附红细胞体病对贝尼尔敏感和猪放线杆菌药敏试验结果,建议对病猪肌肉注射贝尼尔(10 mg/kg体重,隔天1次,连用3次)和氟苯尼考注射液(0.4 ml/kg体重连用3天);整场用土霉素600 g/t拌料,连喂2周。同时,将从病料分离到的猪放线杆菌扩大培养增殖后,制成灭活苗全场紧急免疫,以及全场猪肌肉注射PRRS疫苗。采取上述措施后1周猪发烧、咳嗽、母猪流产得到控制,两周猪采食恢复正常。