鸡败血支原体病和滑膜囊支原体病的诊断
鸡败血支原体病
对鸡群感染败血支原体的监测,通常采用以下几种方法。
(1)全血凝集反应 这是目前国内外用于诊断该病的简易方法,在20~25℃室温下进行,先滴2滴染色抗原于白瓷板或玻板上,再用针刺破翅下静脉,吸1滴新鲜血液滴人抗原中,轻轻
搅拌,充分混合,将玻板轻轻左右摇动,在1~2分钟内判断结果。在液滴中出现蓝紫色凝块者可判为阳性;仅在液滴边缘部分出现蓝紫色带,或超过2分钟仅在边缘部分出现颗粒状物时可
判定为疑似;经过2分钟,液滴无变化者为阴性。
(2)血清凝集反应 本法用于测定血清中的抗体凝集效价。首先用磷酸盐缓冲盐水将血清进行二倍系列稀释,然后取1滴抗原与1滴稀释血清混合,在1~2分钟内判定结果。能使抗原凝集的血清最高稀释倍数为血清的凝集效价。
平板凝集反应的优点是快速、经济、敏感性高,感染禽可早在感染后7~10天就表现阳性反应。其缺点是特异性低,容易出现假阳性反应,为了减少假阳性反应的出现,实验时一定要用无污染、未冻结过的新鲜血清。
(3)血凝抑制试验 本法用于检测血清中的抗体效价或诊断本病病原。测定抗体效价的具体操作与新城疫血凝抑制试验方法基本相同。反应使用的抗原是将幼龄的培养物离心,将沉淀细胞用少量磷酸盐缓冲盐水悬浮并与等体积的甘油混合,分装后于-70℃保存。使用时首先测定其对红细胞的凝集价,然后在血凝抑制试验中使用4个血凝单位,一般血凝抑制价在1:80以上判为阳性。诊断本病病原时可先测其血凝价,然后用已知效价的抗体对其做凝集抑制试验,如果两者相附或相差1—2个滴度即可
判定该病原体为本支原体。此方法特异性高,但敏感性低于平板凝集试验,一般鸡感染3周以后才能被检出阳性。
(4)琼脂扩散试验 用兔制备抗支原体的特异性抗血清,主要用于各种禽支原体的血清分型,也可用于检测鸡和火鸡血清中的特异性抗体。
(5)酶联免疫吸附试验 本试验具有很高的特异性,而且敏感性比HI试验高许多倍。其抗体在感染后约与HI试验相同时间测得,其缺点是容易出现假阳性反应,这个问题可以通过使用改进的抗原制剂来消除。
滑膜囊支原体病
检测鸡群血清抗体最常用的方法是血清平板凝集试验和琼脂扩散试验,受感染的鸡一般需要2~4周才能产生抗体,所以第一次血清学检查阴性,不能得出结论,还需要间隔数日再做几次重复检查。另外,鸡败血支原体抗原与滑膜囊支原体抗原之间有交叉反应,对此情况可用HI试验进一步确认,因两者在此反应中无交叉反应。用血清学检测本病感染情况时,需要注意的是乎板凝集试验常会出现非特异性凝集反应,尤其是注射过油乳剂疫苗的鸡,有这种情况发生时,需要用琼脂扩散或血凝抑制试验证实反应的特异性。