一、取新鲜病死鸡心血、胆汁、肝、脾触片革兰氏染色镜检,可看到革兰氏阴性菌,菌体呈多种形态,主要呈海鸥形、S形、弧形及螺旋形。
二、无菌采取新鲜病死鸡的肝、胆汁,分别用划线接种在鲜血琼脂培养基上,置10% CO2培养罐中42℃培养24~48 h后,培养基表面长出针尖大小、圆形、光滑、不溶血、微突、几乎完全透明的小菌落。挑选上述纯可疑菌落,继续进行培养,将其接种于接种在8日龄的鸡胚卵黄囊内,每枚胚接种0.2 ml,共接种9枚,接种24 h内死亡胚弃掉1枚,24~72 h内死亡3枚,其余5枚72~120 h内死亡,剖检皮肤体表出血,肝脏坏死。收集死亡鸡胚的尿囊液、卵黄,涂片染色镜检结果其形态与病料涂片结果所述相同;用一滴尿囊液悬液放在载玻片上,暗视野下观察,见菌体呈螺旋状运动;采用鞭毛染色镜检,可见到菌体一端有鞭毛,个别两端有边毛。
三、将得到的细菌的纯培养物置于低氧(5%)条件下进行生化反应,发现本菌不氧化也不分解葡萄糖、果糖、蔗糖等碳水化合物;靛基质、V-P、M.R.、H2S、尿素、枸橼酸钠盐、丙二酸盐、明胶等均为阴性;氧化酶、过氧化氢酶试验阳性;硝酸盐还原阳性。基本符合空肠弯曲杆菌生化特性。
四、无菌取上述尿囊液及病鸡肝、胆汁、脾研磨后1∶5生理盐水稀释成的悬液,各口服接种30日龄健康蛋用鸡6只,结果24 h内全发病,剖检病变、镜检等与前述患病鸡相同。综合诊断 通过以上临床症状、实验室诊断、动物实验等手段,确诊为育成鸡的空肠弯曲杆菌病。