1.保存血清的最好方法?
我们建议血清保存在-5摄氏度至-20摄氏度。若存放于4摄氏度时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器中,再放回冷冻。
2.如何解冻血清才不会是产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后,先置于2摄氏度至8摄氏度冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须摇晃均匀。
3. 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理/
血清中沉淀物的出现有许多原因,但普遍的原因是血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可加入培养基内一起过滤。最好不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能阻塞过过滤膜。
4.为什么要热灭火血清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,平滑肌细胞时,推荐使用灭火血清。
5.有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清多细胞的增长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常认为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑虫”,常常会让研究者误以为血清遭受污染,而把血清放在37摄氏度的环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量。
6.为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
有些胎牛血清产品没有预老化,储存在2-8摄氏度,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,纤维蛋白原,玻璃粘连蛋白)可能聚集而形成沉淀或可见的浑浊。这应该不会影响血清的质量。推荐-20摄氏度储存胎牛血清,避免反复冻融。