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猪圆环病毒病诊断技术

放大字体  缩小字体 发布日期:2009-09-01  来源:中国兽药114网  作者:信风  浏览次数:277

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起的一种传染病,其主要特征为猪的体质下降、消瘦、腹泻、呼吸困难、咳嗽、贫血和黄疸等。猪圆环病毒(Porcine circovirus, PCV)属于圆环病毒科、圆环病毒属,为单股负链环状DNA病毒,分为1型和2型。目前还没有猪圆环病毒1型导致猪发病的报告,临床上猪感染猪圆环病毒2型很常见,普遍认为广泛存在于猪体内及猪源传代细胞系,由于其无致病性,所以无法通过临床症状或病理诊断来确定是否感染猪圆环病毒2型。但猪圆环病毒2型与猪群中发生的多种疾病相关,有其相应的临床症状和病理表现,在临床上主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎肾病综合征、猪增生性坏死性肺炎、猪呼吸道疾病复合征及猪先天性震颤。猪圆环病毒2型与猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病毒等病原可以混合感染,致病性增强,从而增加猪群的死亡率。

猪圆环病毒病的诊断需要结合流行病学、临床症状、病理变化及实验室诊断相结合才能够确诊。

1、流行病学

猪对圆环病毒有较强的易感性,不同月龄的猪由呼吸道和消化道感染发病。5-16周龄的猪易感,尤其是5-12周龄的仔猪,一般于断奶后1-3周开始发病,急性发病猪群中病死率为10 %,如发生混合感染或继发感染,病死率可达25%以上。耐过猪后期发育明显受阻,抵抗力下降,有时并发其它细菌病和病毒病,使死亡率大大增加,猪场饲养管理不良、密度过大等常能诱发此病。

2、临床症状

猪感染圆环病毒2型,临床主要表现为体温升高、精神沉郁、食欲降低、猪只渐进性消瘦或生长迟缓,体重减轻,贫血、皮肤苍白、肌肉衰弱无力、呼吸急促、咳喘、行动迟缓、被毛蓬乱无光泽、水样下痢或黑便,部分仔猪出现神经症状,四肢呈划水状等,个别猪关节肿胀,眼有分泌物。体表淋巴结肿大,特别是颌下和颈部淋巴结及腹股沟淋巴结肿大,肿胀的淋巴结有时可触摸到,多重感染会明显加重上述临诊症状,并使病情变得极为复杂,用药效果不明显。

3、病理病变

病死猪被毛蓬乱,皮肤苍白,个别表现为黄疸,淋巴结肿大,切面苍白,肺脏有出血斑,呈间质性肺炎、肿胀、间质增宽、质度似橡皮样,肺表面有红色至灰褐色的斑点。脾脏肿大,质地如肉,肾脏肿大苍白,被膜下有白色的坏死灶,肝脏边缘肿胀,肝小叶间结缔组织增生明显,有的有纤维素膜包被,有的肝细胞坏死。腹股沟、肺门、肠系膜及颌下淋巴结肿大4倍-5倍,严重者为8倍-10倍,切面呈灰黄色,有出血。心内外膜出血,胸膜与肺发生粘连,胸腔内有少量纤维蛋白。剖检中最主要的症状是胃黏膜有的溃疡,有的穿孔,严重的整个胃像“筛子”。

4、实验室诊断技术

利用电镜技术可以直观、准确的鉴别病毒,根据病毒本身所具有的形态、结构和大小等不同特征,可即刻做出诊断。

利用兔高免血清结合福尔马林固定石蜡包埋组织中的猪圆环病毒2型抗原,再采用生物素标记的抗兔二抗与兔血清结合,最后用过氧化物酶标记的链霉素染色,此法可以发现阳性细胞内存在大量浓染的圆形结构,大小和形状与包涵体相似。

免疫荧光技术(IFA)可用于PCV的抗体检测及抗原组织定位的研究。是实验室检测猪圆环病毒2型的一种快速、灵敏、成本低的方法。

酶联免疫吸附试验(ELISA)可以检测猪圆环病毒2型抗体,也可以检测其抗原,具有灵敏、简单、快捷的特点。

免疫过氧化物酶单层细胞试验是将生长有PCV的PK215细胞在96孔板上长成单层后检测血清中的抗体。免疫过氧化物酶单层细胞抗体检测试剂盒,用于猪血清中圆环病毒2型抗体检测,具有特异、敏感、操作简便、实用性强等特点。

实验室确诊依赖于病毒抗原检测和病毒抗体的检测。病毒抗原检测采用的方法有间接免疫荧光技术、核酸探针及原位杂交技术和聚合酶链诊断技术;病毒抗体的检测技术有酶联免疫吸附试验等;除此,尚有分子生物学技术。这些诊断方法中以聚合酶链诊断方法应用较多。目前,已有市售的圆环病毒2型抗体诊断试剂盒。


 
 
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