“乳康2号”对奶牛细菌性乳房炎的疗效研究

摘　要：用“乳康2号”治疗临床型乳房炎奶牛37头。结果表明，治愈28头，有效6头，无效3头，总有效率为91.89%，平均治疗时间4.7d。对采集的37头奶牛治疗前的42个乳区奶样，进行细菌学检查，有33个乳区检出与乳房炎有关的病原菌，占78.57%。检出病原菌5种，主要为无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、乳房链球菌和大肠埃希菌。停药后采集33个乳区奶样，结果有14个乳区细菌转阴，细菌转阴率为42.42%。在转阴的病原菌中，大肠埃希菌转阴率最高(100%)，其次是混合感染(60.00%)和乳房链球菌(50.00%)。

关键词：乳康2号；乳房炎；病原菌；奶牛

奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业最主要的疾病之一，它不仅影响奶牛产奶量，而且影响乳的品质，给奶牛养殖业造成巨大的经济损失^[1­2]。大量研究结果表明，奶牛患隐性乳房炎后每天产奶量可减少10%～15%。多年来，抗生素在防治奶牛乳房炎方面发挥了重要作用^[3­4]，然而，由于大量反复使用抗生素，造成乳房炎病原菌耐药性增加，抗生素大量残留，威胁到人类的健康^[5­9]。随着人们对绿色无抗奶需求的增加及国家对乳制品质量更严格的要求，临床治疗乳房炎常用的抗生素由于存在药物残留将逐渐被限用或禁用。中药是纯天然物质，含有多种生物有效成分，具有抗菌、消炎、不易产生细菌耐药性、低毒、无残留或低残留等特点，因此，应用中药治疗奶牛乳房炎已日益成为国内外研究的焦点。十五期间我们承担了国家奶业专项子课题，经过多年的研究，研制成功了具有良好的治疗奶牛乳房炎的纯中药口服制剂——乳康2号。为了进一步探讨其治疗临床型乳房炎前后对乳汁中细菌变化的影响，进行了试验。

1　材料与方法

1.1　试验用药物

乳康2号为中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所药厂生产，批准文号甘兽药字(2003)Z，批号20050401。本品主要由蒲公英、金银花等中药组成，具有抗菌，消炎，清热解毒，活血化淤，消肿散结的作用。

1.2　培养基

70 mL/L羊血琼脂平皿、普通牛肉汤由兰州荣昌生化试剂厂购入；各种生化鉴定培养基，由课题组制作。

1.3　奶样采集

1.3.1　奶样来源　奶样采自甘肃荷斯坦良种奶牛繁殖中心和兰州市伏龙坪奶牛场患临床型乳房炎的奶牛37头，42个乳区治疗前后的奶样共计75份。

1.3.2　采样方法　先用温水清洗后用750 mL/L酒精棉球檫拭乳头及术者手指，挤出前两把奶废弃，然后用灭菌试管接取奶样5mL左右，用胶塞封口，注明牛号，采样的乳室及日期，立即送检。

1.4　细菌分离

奶样摇匀后，挑取3～5铂耳圈涂布于血琼脂平皿，同时接种肉汤1管(用作增菌培养)，均置37 ℃温箱中培养20 h～24h后取出，挑选可疑菌落纯化，移入肉汤管和血斜面上。在血平皿上未长菌的奶样，用其增菌培养肉汤再接种一次，培养48h后，检查菌落以免漏检。培养48 h后仍不长菌，且乳汁外观正常，即可认定无菌。

挑选纯化的菌落在肉汤、斜面上生长后，取肉汤培养物涂片，革兰氏染色，镜检，根据细菌形态、特征，初步确定细菌种类，然后进行生化鉴定，确定病原菌。

1.5　治疗方法

乳康2号，口服煎剂，每天一次，每次1 000 mL，连用3 d为一疗程，个别病例加灌1 d～2 d或一疗程。

1.6　疗效判定

1.6.1　痊愈　用药1个～2个疗程后，乳房红、肿、热和痛消失，乳汁外观正常，产奶量、精神、食欲等恢复正常，病原菌转阴或未转阴。

1.6.2　有效　用药1个～2个疗程后，乳房红、肿、热和痛症状减轻，乳汁絮状物基本消失或明显减少，产奶量回升，病原菌全部转阴或部分转阴。

1.6.3　无效　用药2个疗程，临床症状未减轻，或在治疗过程中病情加重而改用其他治疗方法者。

2　结果

2.1　治疗效果

用乳康2号合剂口服治疗37头患临床型乳房炎的奶牛，治愈28头，占75.68%；有效6头，占16.22%，无效3头，占8.11%；总有效率为91.89%，平均治疗时间4.7d(表1)。

表1　乳康2号治疗临床型乳房炎结果

Table 1　The efficacy of the“Rukang 2”in clinical mastitis

2.2　乳康2号合剂治疗前后乳汁中病原菌检出情况

治疗前采集42个乳区的临床型乳房炎奶样，进行细菌学检测，结果有33个乳区检出与乳房炎有关的病原菌，占78.57%。检出病原菌5种，主要为无乳链球菌39.39%，停乳链球菌21.21%，金黄色葡萄球菌16.13%，乳房链球菌6.06%、大肠埃希菌3.03%，混合感染15.15%。停药后采集33个乳区奶样，进行细菌学检测，结果有14个乳区细菌转阴，转阴率为42.42%。在转阴的病原菌中，大肠埃希菌转阴率最高(100%)，其次是混合感染(60.00%)和乳房链球菌(50.00%)(表2)。

表2　乳康2号治疗临床型乳房炎前后乳汁中细菌变化情况

Table 2　The changes of bacterial quantities in clinical mastitismilk before and after treatment by“Rukang 2”

3　讨论

随着人们对绿色无抗奶需求的增加，中药制剂治疗乳房炎越来越受到养殖户的欢迎^[10­11]。中国中兽医学称临床乳房炎为“乳痈”，是因痰、湿、气、血郁结不散而起。主要征候为乳房出现红肿热痛，乳汁稀薄，发黄有絮块，甚至出现泌乳停止及精神沉郁、食欲减少或废绝、体温升高等全身症状。治疗主要以清热解毒、抗菌消炎、通经活血、消肿止痛、活络通乳为原则。在这一理论指导下，我们从中草药中筛选了蒲公英、金银花等中药，根据不同的组方原则及体外抑菌试验，研制出了治疗奶牛乳房炎的纯中药制剂“乳康2号”。临床治疗试验结果表明，乳康2号合剂对奶牛临床型乳房炎具有良好的治疗作用。尤其是对慢性乳房炎及乳房出现肿胀的病例有非常好的清热消肿和活血化淤功效。本次试验治疗37头患临床型乳房炎的奶牛，治愈28头，占81.82%；有效6头，占16.22%，无效2头，占5.41%；总有效率为94.59%，平均治疗时间4.7d。对治疗前后乳汁中细菌进行分离鉴定，结果表明，乳康2号合剂对病原菌总的转阴率为42.42%，这一结果与刘纯传等^[12]报道的用复方蒲公英煎剂治疗临床型乳房炎，其病原菌转阴率为40%的结果相一致。此外，试验中还发现，虽然有部分病牛治疗后细菌未转阴，但细菌数量明显比治疗前减少。本次试验表明，乳康2号合剂对大肠埃希菌感染病例的转阴率最好(100%)，其次是混合感染(60.00%)和乳房链球菌感染(50.00%)。乳康2号合剂的研制成功，对于更好的治疗乳房炎，尤其是慢性难治性乳房炎，减少药物残留和抗药性，为人们提供更多的绿色牛奶具有重要的意义。

有关药物治疗乳房炎前后细菌变化情况的研究，国内外少有报道。对于临床型乳房炎的疗效判定，一般多以临床症状的有无为判定依据，认为乳房红肿热痛消失，乳汁肉眼观察正常，乳汁细胞数正常，奶产量恢复或基本恢复，即为痊愈。然而，我们根据临床乳房炎发病的特点，发现许多临床型乳房炎治愈后复发的原因主要与乳汁中细菌未完全转阴有关，因此，对临床型乳房炎判定疗效时，除观察临床症状外，还应结合细菌学检验可能更为合理。