口蹄疫是哺乳动物高度接触性烈性传染病,OIE列为A类传染病之首。2005年口蹄疫亚洲Ⅰ型在中国的少数地区暴发,那么研究FMD AsiaI免疫程序,就成为了兽医工作的当务之急。
1切材料与方法
1.1 血清标本 采集自正常饲养的6个养羊场(户)。
1.2 FMD液相阻断ELISA(LPBELISA)试剂盒诊断试剂 由中国农业科学院兰州兽医研究所提供。
1.3 FMD AsiaI油乳剂灭活疫苗 由新疆天康公司提供。
1.4 免疫方法 按照疫苗说明书操作,并根据检测抗体的平均滴度(低于1∶128)适时进
行免疫。
1.5 抗体监测时间 母源抗体和首免、二免、三免抗体监测时间及次数见表1~4。
1.6 检测方法 按照试剂盒说明书和参考实验室提供的操作程序进行抗体定量检测。
1.7 数据处理 依据中国农业科学院兰州兽医所参考实验室提供的FMDELISA抗体效价与
保护力的关系,即“牛羊抗体效价≥1∶128,99%保护”,以此评估抗体滴度平均值来确定
每次免疫时间。
2 结果
2.1 母源抗体消长情况 见表1。
表1 母源抗体检测表(1∶X)
日龄 0 7 14 21 28 42 56
平均滴度〖〗303〖〗210〖〗243〖〗162〖〗206〖〗137〖〗81
2.2 首免抗体消长情况 见表2
表2 首免抗体检测表(1∶X,60日龄首免)
免后天数 7 14 21 28 35 42 49
日龄 67 74 81 88 95 102 109
平均滴度 111 137 127 352 180 12 10
2.3 二免抗体消长情况 见表3。
表3 二免抗体检测表(1∶X,110日龄二免)
免后天数 7 14 21 28 58 118
日龄 117 124 131 138 168 228
平均滴度 363 424 231 201 166 196
2.4 三免抗体消长情况 见表4。
3 结果分析
3.1 抗体消长分析 从母源抗体消长结果来看,随着日龄增长呈下降趋势,1∶128以上的抗体滴度可维持到42日
龄。在一定时间范围内略有起伏,分析其原因,主要是由于个别点的实验羊感染其他疾病干扰免疫力所致。
表4 三免抗体检测表(1∶X,230日龄三免)
免后天数 14 28 58 88
日龄 244 258 288 318
平均滴度 304 231 162 168
从首免后抗体消长结果看,总体趋势是抗体滴度逐步上升,然后迅速下降。反映了易感动物初次免疫后,所产生的抗体不够稳定,这点同免疫学理论基本吻合。从抗体的峰值看,首免后的最高抗体滴度出现在首免后28天,达到1∶352。
二免后抗体消长情况显示,总体趋势是获得了相对首免后更为稳定高效的保护抗体。抗体最高峰值,在二免后14天。从抗体滴度下降的趋势看,相对首免平缓一些。二免后抗体持续期至少可为4个月,但抗体滴度已经接近1∶128。
三免后的抗体水平均保持在的1:128以上,能达到很高的保护率,整体呈逐渐下降趋势,就本项目的监测时间来看,高保护率的抗体可以至少维持3个月。
3.2 羊免疫程序初步分析 首免时间的选择:表1表明,在母羊有效免疫的前提下,羔羊亚Ⅰ型口蹄疫母源抗体平均值在42日龄时还能维持在1∶128以上。由于母源抗体来自母乳,属于中和抗体,可能会干扰疫苗免疫,因此,我们认为新生羔羊口蹄疫亚Ⅰ型灭活油苗的首免时间选择在45日龄时较为合适。
二免时间的选择:首次接种疫苗的作用主要是激活免疫细胞产生免疫记忆,产生的抗体水平不高且维持的时间短,表2表明首免后42~49天抗体水平已经远远低于1∶128,不能形成较高的免疫保护率,一些个体出现免疫空白期。因此在加强免疫时要在免疫空白期出现之前进行免疫,才能对群体进行保护,综合分析认为首次免疫后1个月实施加强免疫比较合理。三免时间的选择:二次免疫之后,机体的主动免疫系统已经被充分激活,并且产生大量抗体,维持时间较长,保护抗体至少可以持续118天。根据总体趋势和生产实际,选择二免后4个月实施三免,免疫后抗体水平能够持续保护88天以上。
3.3 免疫程序的修正 试验得出的免疫程序有必要根据基层便于实施的要求和大面积推广的需要进行修正。修正后羊口蹄疫亚Ⅰ型的免疫程序为:45日龄首免,间隔28天二免,间隔4个月三免,以后每3个月免疫一次.