一起竹鼠巴氏杆菌病的诊断与防治

摘　要：对广西某竹鼠养殖场的一起竹鼠死亡进行了病理学和病原学诊断，并进行了治疗。病理学观察可见竹鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结等充血，实质细胞广泛变性和坏死；肺脏严重水肿、充血，肺泡壁细胞变性、坏死，肺泡内有出血性和纤维素性渗出物，呈大叶性肺炎的充血期和红色肝变期。经病原分离鉴定为多杀性巴氏杆菌感染，通过药敏试验，用青链霉素混合肌注，收到了良好疗效。

关键词：多杀性巴氏杆菌；病理学；分离鉴定；竹鼠

竹鼠又名灰竹鼠、竹狸、竹根鼠等，主要分布在广西、广东、福建、安微、贵州、云南等地^[1]。2007年5月，某人工饲养竹鼠场的10只竹鼠出现明显的食欲不振、精神沉郁等症状，饲养员没有重视，次日发现死于洞中。并且又发现另外5只公竹鼠表现类似症状，测公竹鼠体温均达到40.8 ℃～41 ℃，粪便黏稠或呈水样。为了查明死亡原因，场方请求检验。经对死亡的10只竹鼠进行详细的病理学检查及病原分离鉴定，确诊为多杀性巴氏杆菌病。通过治疗，取得了良好效果。

1　材料与方法

1.1　材料

1.1.1　竹鼠　广西某竹鼠饲养场10只病死的竹鼠和生病的5只公竹鼠。

1.1.2　主要试剂　革兰氏染液、美蓝染液、血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、血清肉汤、琼脂糖、血清琼脂斜面培养基、半固体培养基、水解酪蛋白培养基、生化反应试剂；药敏滤纸；多种抗生素。

1.1.3　仪器　REICHERT　RLISTO STAT手摇式切片机，XK24-006-0484型电热培养箱，OLYMPUS BXUCB/BX61型光学显微镜。

1.2　方法

1.2.1　病理学观察　对病死的10只竹鼠进行详细的尸体剖检，并分别切取心、肝、脾、肺等组织各1块，每块大小均为0.5 cm×1.5 cm×1.5 cm，用100 mL/L中性甲醛溶液固定。常规石蜡包埋并切片，HE染色，光学显微镜下观察。

1.2.2　病原分离鉴定

取病死竹鼠肝脏触片和血液涂片，分别进行革兰氏染色和碱性美蓝染色，然后镜检^[2]。

取病死竹鼠肝脏和淋巴结磨碎，接种在血清肉汤中培养，经24 h后，取肉汤培养物分别接种于血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、半固体培养基、血清培养基上，37 ℃培养18 h～24 h，观察菌落特征，再选取典型的菌落接种到血清琼脂斜面培养基上保存。取培养20 h的肉汤培养物移种于糖发酵培养基中，37 ℃培养24 h～48 h，观察发酵情况。

1.2.3　人工感染试验　试验组将分离到的巴氏杆菌在肉汤培养基上培养，用24 h培养物腹腔接种2周龄的小竹鼠2只，每只0.5 mL；对照组用生理盐水腹腔注射2周龄小竹鼠2只，剂量为0.5 mL/只。

1.2.4　药敏试验　无菌条件下取分离纯化的细菌密集划线接种于整个营养琼脂平板，将6种常用药品的药敏片均匀贴放到平板上。将平板倒置于37 ℃温箱培养24 h，然后观察药物的抑菌情况，并测定各种药物抑菌圈的大小。判定标准为，敏感度按《抗菌药药敏试验判断标准》(由中国药品生物制品鉴定所，卫生部抗菌药物细菌耐药性检测中心制定)进行判断，抑菌圈直径大于15 mm为高敏药物，10 mm～15 mm为中敏，直径为10 mm以下者为耐药^[3]。

2　结果

2.1　病理学观察

2.1.1　眼观　眼观可见眼结膜苍白，腹部、腋下、颈部皮下有不同程度的淤血、出血；胸腔、腹腔、心胞腔积有大量的淡红色浑浊液体；心内外膜、腹膜、肠系膜均可见大量的出血斑点；心室内积聚凝固不良的血液，心肌发黄；肝脏肿大，呈土黄色，切面流出凝固不良的血液；胆汁浓稠，呈深黄绿色；脾肿大，淤血，切面流出凝固不良的血液；肾轻微肿大，有出血，切面结构不清；肺尖叶、心叶、膈叶有明显肝变区，肿大；腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结肿大、出血；胃肠黏膜有不同程度的淤血、水肿；肠壁变薄，肠内充满稀粪便。

2.1.2　镜检　显微镜下可见心肌纤维的变性、坏死。肝细胞变性、坏死。脾脏淋巴细胞坏死，脾小体萎缩，红髓内见大量渗出物。肺泡腔有大量红细胞、纤维素性渗出物和脱落的上皮细胞。

2.2　病原分离鉴定

血液涂片革兰氏染色可见大量典型的红色杆菌，美蓝染色呈明显的两极着色短杆菌。无鞭毛和芽胞，无明显荚膜^[4]。病料肉汤37 ℃培养24 h后开始呈轻微混浊，于管底生成黏稠沉淀物，振摇后不分散，在培养液顶层形成菌环；病料血清琼脂培养24 h后，培养基上可见淡灰白色、湿润、圆形，直径约1 mm～3 mm，半透明、边缘整齐、表面光滑、露珠状小菌落，菌落周围无溶血现象；挑取上述细菌在半固体培养基中培养24 h，无运动性。其生化培养特性与多杀性巴氏杆菌相同(表1)。

表1　生化试验结果

Table 1　Results of biochemical assay

注：“＋”为阳性；“－”为阴性。

Note：“＋”Means positive；“－”Means negative.

.

2.3　人工感染试验

试验组全部发病，体温达到41 ℃，症状与生产中出现的病例症状相同，出现败血症，鼻孔流出带血浆液性黏液，28 h后全部死亡，尸体剖检可见心、肝、肺、脾、肾、淋巴结等均出现特征病变。对照组竹鼠一切正常。

2.4　药敏试验结果

链霉素最敏感，抑菌圈18 mm，其次是青霉素(17 mm)，庆大霉素、红霉素、磺胺、土霉素中度敏感(表2)。

表2　细菌对6种常用抗菌药物的敏感性试验结果

Table 2　Resuts of bacterial sensitivity to six common antimicrobials

3　防治措施

出现临床症状的竹鼠，立即进行隔离，并用链霉素和青霉素各4 000单位/kg混合肌注，每日2次，直至康复。死亡的竹鼠焚烧处理，以免病原扩散。

对竹鼠舍及周围环境作彻底的消毒。对竹鼠舍消毒，是先把竹鼠转移出来，用火焰消毒，待气味消散后放回。对周围环境用100 g/L的生石灰乳喷撒或者用1∶300的消毒威消毒。

在精料中添加适量的黄芪多糖和复合维生素，并添加1 g/kg的土霉素，增加粗饲料(玉米芯、甘蔗、竹根、橡草杆等)，减少精料。注意保证饲料的质量，不喂霉变的饲料，预防发病。

4　讨论

竹鼠一般情况下很少发病，但在高密度饲养条件下，也会发病。饲养条件差，饲料单一，多种维生素缺乏，天气突变等情况下也会发病。

本病的流行没有明显的季节性，以春、夏季多发，秋、冬季节少见。不同年龄的竹鼠均可感染，但以幼年竹鼠最易感。

可用单种或多种抗生素联合治愈。链霉素与青霉素配合效果较好；磺胺在药敏试验中仅中敏，但实际生产中配合等量的小苏打效果也较好。

气温过高也会引起中暑，表现为严重口渴，大量喝水或者昏睡。气温过高时要注意通风降温，可开电风扇降温。可适当喂些雪连，每只竹鼠喂10 g～50 g，每天只喂1次，注意不能多喂，否则引起拉稀。

气温过低时，容易引起感冒。要注意防风保温，可用彩条布等盖住竹鼠舍，并在竹鼠舍内垫些干稻草。寒冷季节可增加高能量的饲料，如玉米，豆粕(炒熟)等。

4.6　竹鼠疾病的研究报道^[5]和竹鼠饲养技术的报道^[6]有许多文献。但竹鼠巴氏杆菌病的报道本文是首次。