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兽医临床中的药敏试验方法及选药原则

放大字体  缩小字体 发布日期:2008-12-20  来源:中国兽药114网  作者:信风  浏览次数:1140

1药敏试验的意义

可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性,指导临床合理用药。

可以对流行病学调查进行监控,控制和预防耐药菌株的流行。因为随着新型致病菌的不断出现,各种致病菌对不同的抗菌药的敏感性不同,同一细菌的不同菌株对不同抗菌药的敏感性也有差异。进行有效的药敏试验,可以及时掌握各种新型菌种和菌株的耐药性。

为临床用药提供参考依据。因为正确的药敏试验结果,可作为临床兽医和畜禽养殖者选用有效抗菌药的参考。

2常用的药敏试验方法

兽医临床常用的药敏试验方法主要有扩散法和稀释法。其中扩散法属手工测试方法,通过测试药物纸片或者牛津杯在固体培养基上的抑菌圈的大小,判断细菌对该种药物是否敏感。稀释法包括试管稀释法和微量稀释法,通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况,判断其最低抑菌浓度(MIC)。

由于扩散法操作简单,成本低,已经被大多数实验室和基层单位所采用。扩散法又包括纸片法&牛津杯法和打孔法,目前牛津杯法和打孔法在兽医临床已较少应用。以下简单介绍纸片法。

2.1药敏纸片的制作

纸片法中使用的药敏纸片目前市场上已有较多厂家的产品销售。但也可根据需要自制,具体自制的方法为取质量较好的定性滤纸,用普通的打孔器打成直径6毫米的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的小瓶或小平皿中,以单层牛皮纸扎口或包扎。经15磅15~20分钟高压灭菌后,置于37,温箱或烘箱中数天,使完全干燥。按每张纸片饱和吸水量为0.01毫升计,在上述含有50片纸片的小瓶内加入药液0.5毫升,不时翻动,使滤纸片将药液均匀吸净,一般浸泡30分钟即可。同时记录药物名称,于37℃温箱过夜。在温箱或烘箱中的时间不宜过长,以免某些抗生素失效。青霉素&金霉素宜在低温下真空干燥。干燥后即密封。切勿受潮,置阴暗干燥处或家用冰箱中保存,有效期4~6个月。

2.2药液的制备

自制药敏纸片时还需自行配制抗菌药液。抗菌药的稀释剂通常用纯化水。一般可按商品药使用说明书上的配料或饮水浓度,按1克需加多少毫升水或配多少毫克饲料,就相当于配制药液所加纯化水的毫升数。如10克药物可配50千克饲料,其换算方法为1克本品加5000毫升纯化水。此溶液液即为用于做药敏试验的药液。

2.3试验操作方法

在超净工作台中或酒精灯旁,用无菌棉签或经酒精灯火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物,以划线方式将菌液均匀涂布到平皿中的固体培养基表面。然后用无菌镊子将纸片放于固体培养基表面并轻压,使纸片与培养基表面完全接触。为了能准确观察结果,要求药敏纸片均匀分布于培养基上,位置安排适中,防止出现抑制圈重叠。一般各纸片中心相距应大于24毫米,可在平皿中央贴1片,外周等距离贴5~6片。记住每种药敏纸片的名称。贴完纸片的平皿15分钟后再置于37℃温箱中培养16~24小时,观察记录结果。以药敏纸片周围没有肉眼可见生长物区域为抑菌圈,根据抑菌圈直径大小判断细菌对抗菌药的敏感性。

药敏试验结果判定标准。抑菌圈直径(毫米)敏感性>20极敏感15~20高敏感10~14中敏感<10低敏感不敏感。

3根据药敏试验选药原则

完成药敏试验后,应根据结果选择敏感性较高,同时价廉&易得&安全的药物进行治疗,以减少耐药菌株,同时还应注意在选择高敏药物时还应考虑药物的吸收途径。因为药敏试验是药液直接和细菌接触,而在给畜禽用药时,必须通过机体的吸收才能使药物发挥疗效,所以在给畜禽用药时,高敏药物一定要配合适宜的给药方法,并予以足够剂量&足够疗程,才会取得好的治疗效果。


 
 
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