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毛细管电泳实验常见问题解答(二)

放大字体  缩小字体 发布日期:2008-03-15  来源:中国兽药114网  作者:高强  浏览次数:361

七、电流泄漏(Current Leakage)
检查毛细管是否在窗口处断裂
①毛细管断裂。可能原因——毛细管内缓冲溶液流出造成电流泄漏。解决方法——更换新毛细管,并用水清洗光纤头及检测窗口。
②毛细管无断裂。可能原因——实验环境湿度过大。解决方法——使用抽湿机,并打开仪器Cartridge Cover;如果没有抽湿机可以使用空调,在湿度过大的情况下可在仪器关闭时放置干燥剂,但是在仪器运行时一定要将干燥剂取出。

八、无法加气压
检查瓶塞是否盖紧或更换瓶塞。
①更换后问题解决。可能原因a瓶塞老化,失去弹性。解决方法——请购买新的瓶塞,并注意瓶塞不可烘干,只能自然晾干。b瓶颈处有液体,导致瓶塞易滑。解决方法——向瓶中装液体时不要过满,也不要沾湿瓶颈。
②若瓶塞无问题,可先采用真空方式,若真空方式可以使用,但压力仍不可用。可能原因——压力系统问题。解决方法——请联系工程师。

九、迁移时间可重复但峰面积重复性不好
重新切割毛细管两端。
①若问题解决。可能原因——毛细管入口处不平。解决方法——重新切割毛细管入口,注意毛细管切割方法,不可以用力过猛或反复刮擦。
②问题依然存在,尝试电动进样。可能原因——若电动进样可保持重现,则压力控制或气路存在问题。解决方法——请联系工程师。

十、毛细管或电极易折断
①检查瓶盖是否老化。可能原因——瓶盖老化。解决方法——购买新的瓶盖。
②电极是否不垂直。可能原因——电极不垂直。解决方法——将电极拉直。

十一、冷却液泄漏
检查卡盒内垫圈和卡子。
可能原因a:漏装或装错顺序。解决办法——严格按照操作手册上的安装顺序安装。
b仪器内部管路密封不严。解决办法——请联系工程师。

十二、PDA光强低
检测窗口Aperture型号。可能原因——使用了窄细缝的Aperture。解决办法——请在使用DAD检测器时务必使用标有8的Aperture。

十三、谱图基线不稳定
①先用0.1N NaOH冲洗毛细管,然后不进样运行原方法。
a基线改善。可能原因——则为样品中物质有吸附。解决办法——重新预处理样品或更改电泳条件。
b基线未改善。可能原因——毛细管内有强烈吸附,或缓冲体系不稳定。解决办法——更换新的毛细管,不进样,只运行缓冲,观察基线情况。
②更换新毛细管后基线仍然不稳,可采用Run Buffer A测试。
a基线改善。可能原因——缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢。解决办法——更换缓冲溶液种类,若基线变化对检测无干扰,可保持原来电泳条件。
b基线未改善。可能原因——检测光源或其他光学器件不正常。解决办法——请联系工程师。

 
 
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