摘 要:将植物材料用有机溶剂提取,测定提取物的红外光谱,用这种方法获得不同地区及同一地区不同季节采集的苦皮藤(Celastrus angulatus)根皮的红外光谱具有明显的特征性及稳定性,而且与同属不同种的植物根皮的红外光谱差异很大;苦皮藤根皮和不同比例的南蛇藤(Celastrus orbiculatus)根皮混合后的红外光谱图变化则介于两种纯植物根皮的红外光谱图之间,发生某些峰强度的消弱或增强。这些研究结果说明以红外光谱来鉴别与苦皮藤根皮形态相似的物种以及检验苦皮藤根皮的纯度是可行的。
关键词:苦皮藤,红外光谱,物种鉴别
近年来,利用红外光谱鉴别物种的研究进展很快。Naumann等研究了病原细菌的红外光谱特征并将其用于细菌的分类鉴定,龚报森等进行了小麦网腥黑粉菌与光星黑粉菌冬孢子的红外光谱比较研究,特别是利用红外光谱进行中药材真伪的鉴定越来越受重视,如田建国等用红外光谱鉴别黄连和大黄、葛根和粉葛根,周天达和张冰用红外光谱鉴别熊胆、牛胆和猪胆。
苦皮藤(Celastrus angulatus),卫矛科南蛇藤属落叶灌木,是我国最有开发价值的杀虫植物之一,主要以其根皮作杀虫剂用。苦皮藤乳油及其制造方法已获国家发明专利。要保证苦皮藤乳油的质量,首先要把好原料(根皮)收购中的质量关,鉴别苦皮藤根皮的真伪。为此,我们进行了苦皮藤红外光谱特征在近似种鉴别中的应用研究,旨在探讨红外光谱鉴别苦皮藤根皮(尤其是经粗粉碎后)真伪的可能性。
1 材料和方法
1.1 植物样品
1.2 仪器
日立260-10型红外分光光度计,分辨率4/cm。
1.3 方法
称取50g根皮粉,以150mL苯在85℃下回流提取3 h,过滤;滤渣中加入9OmL苯,回流提取2 h,过滤。合并滤液,用旋转蒸发器在50℃左右蒸去溶剂,得粗提物。加l0mL氯仿溶解,以5mL甲醇15mL蒸馏水的混合液萃取两次,收集氯仿层,通风橱中自然蒸发除去溶剂,45℃烘箱中放置24h。称取2.0mg,加入150mg溴化钾压片,记录红外光谱,扫描范围4000—650/cm。
2 结果与分析
2.1 苦皮藤红外光谱的特征及重复性 .
同一地区不同季节采集的苦皮藤根皮的IR图谱,图2是不同地区苦皮藤根皮的IR图谱。从这些图谱可以看出,不同地区采集的苦皮藤以及同一地区不同季节采集的苦皮藤,其根皮提取物的红外吸收光谱具有良好的特征性和重复性,虽然谱线之间在某些区域呈现微小的差异,但其特征峰位置及图谱轮廓是相同的。根据其特征峰位置及谱图轮廓鉴别苦皮藤根皮是可行的。
2.2 同属植物的红外光谱比较
两种南蛇藤属植物南蛇藤和大芽南蛇藤根皮提取物的IR图谱,相比较,这两种植物的红外光谱,其轮廓和峰形与苦皮藤都有明显区别,如在3500~3000/cm区域,图3的谷区平缓,只有几个小峰,是个吸收强度很大的谷区;在1630/cm 和1500/cm处,图呈现2个小的吸收峰。因此,尽管南蛇藤和大芽南蛇藤根皮在外部形态、气味等和苦皮藤相似,但比较其根皮提取物的红外光谱,可以比较容易地鉴别出苦皮藤根皮。
2.3 掺杂苦皮藤的红外光谱比较
07、09样品及二者不同比例混合后的红外光谱图。可以看出,l1、12号样品的谱线与09号样品的谱线相似程度大,13、14号样品的谱线则与07号样品的相似程度大。如:在35O0—3000/cm之间,O9号样(南蛇藤)谷区平缓,只几个小峰,而07号样(华县苦皮藤)是个吸收强度很大的谷区,11、12号样(80%南蛇藤+20%苦皮藤、60%南蛇藤+40%苦皮藤)主要表现09号样的平缓峰形,而13、14号样(40%南蛇藤+6O%苦皮藤、20%南蛇藤+80%苦皮藤)则表现出苦皮藤的大谷区强吸收峰,且随苦皮藤比例增大,吸收强度增强;由于苦皮藤没有同南蛇藤一样在1630/cm.1和1500/cm处的小吸收峰,从l1号至14样,随着苦皮藤量的增加,两峰逐渐被削弱,到14号样时,1630/cm处已成肩峰,1500/cm处完全被掩盖;苦皮藤吸收峰被削弱主要表现在740/cm处,南蛇藤在740/cm处没有吸收峰。因此,从14号至11号样,随着南蛇藤的混入量增加,740/cm的吸收峰渐次减弱,至混入量达80%时,740/cm处已成肩峰。因此,利用红外光谱鉴别苦皮藤是否掺杂也是可行的。
3 讨 论
(1)对采自不同地区、不同季节的苦皮藤根皮提取物进行红外光谱测定,目的在于确定不同情况下苦皮藤红外光谱的特征性和重复性。从测定结果可以看出,不同情况下的苦皮藤红外光谱虽有些微小差别,但整个光谱图的轮廓是很相似的,具有其特征性,而且这种特征性是稳定的。因此,只要样品的提取方法和测定方法标准化,红外光谱可以作为鉴别苦皮藤根皮的手段,以区别于其他植物,特别是南蛇藤属植物。
(2)不同地区或同一地区不同季节采集的苦皮藤根皮,其提取物的IR谱图仍然存在一些小的差异。如:在陕西周至同一地点采集的春季和冬季根皮(即O2、O1号样)在740/cm处的吸收强度明显大于其它样品;周至作为一个地区的样品(4个季节),在122O一1020/cm之间的峰数和峰形较其它地区的样品简明,这些差异说明不同采集地点、不同采集时间对苦皮藤所含的化学成分确有影响,这种影响可能来自所含各组分的比例不同或含量不同而造成的差异。如果不同情况下的苦皮藤根皮提取物的红外光谱具有各自恒定的差异点,这种差异点就有可能作为苦皮藤不同产地、不同采集时间等的鉴别依据。由于我们测定的样品较少,尚达不到这种程度,这个问题有待进一步研究。