麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedra sinica Stapl、中麻黄Ephedra intermedia Schrenk et C.A.Mey.、或木贼麻黄Ephedra equidetina Bge.的干燥草质茎。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定其盐酸麻黄碱的含量。文献报道的麻黄及其制剂中盐酸麻黄碱的含量测定方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法和紫外分光光度法等。
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》麻黄含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸（9：87）为流动相；检测波长为207nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不得低于3000。
供试品溶液的制备：取本品细粉约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25m，超声处理（功率160W，频率50kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液1ml，置中性氧化铝柱（100～200目，1.5g，内径1cm）上，用50%的甲醇洗脱，收集洗脱液约9ml，置10ml量瓶中，加磷酸1滴，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
文献报道的HPLC法，常用的流动相系统有以下几种：
A：乙腈-磷酸溶液：
①Waters 600E 液相色谱仪；色谱柱为Kromo silODS C18 (5μm, 4. 6mm ×250mm ) , 以乙腈-0.1%磷酸(14：86)为流动相；检测波长210nm；柱温室温。
②Agilent 1100 高效液相色谱仪；色谱柱为Agilent ZORBAX ExtendC18柱(250mm×4.6mm, 5 μm)；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液(5：95)；检测波长为210nm；柱温为室温。
B：乙腈-磷酸二氢钾溶液：
① 岛津LC-10ATVP 高效液相色谱仪；色谱柱：ODS C18 （4.6mm×250mm, 5μm）(日本岛津公司)；流动相：乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,磷酸调pH2.7)( 5：100)；柱温室温；检测波长210nm。
②Angilent HPLC仪；色谱柱为YWG C18 反相柱(200mm×4.6mm,10μm)；流动相为乙腈-0. 02mol/L磷酸二氢钾溶液(含0.2%三乙胺,磷酸调PH为2.7) (4：96)；柱温为室温,检测波长为210nm。
③岛津LC-10Atvp；色谱柱：DiamonsilTM C18 柱,ODS2（5μm,150mm×4.6mm）(迪马科学仪器公司)；流动相：甲醇-0.01mol/ L 磷酸二氢钾溶液(8：92) (磷酸调节pH=2.5)；检测波长208nm；柱温30℃。
④HP1100 高效液相色谱系列；Kromasil C18 分析柱(4.6mm×250mm,5μm)；流动相：甲醇-0.1mol/ L磷酸二氢钾(40：60)；检测波长210nm。
供试品溶液的制备方法：一般以甲醇-盐酸混合溶液或盐酸溶液超声提取。另外，如：取本品装量差异项下的内容物,研细,混匀,取1 g,精密称定,置蒸馏瓶中,加水10mL,加氯化钠7.5g和20%氢氧化钠溶液100mL,蒸馏,用预先盛有0.5mol/L盐酸溶液5mL的100mL量瓶收集蒸馏液近95mL,加水至刻度,摇匀,即得。（王瑞明等，“HPLC测定苏杏胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量”，中成药，2005，27（6期））
其它条件如：张美玲测定小儿止咳平喘露中盐酸麻黄碱的含量，采用色谱柱为Zorbax CN 柱(250nm×4.6nm)，流动相为0.1mol/ L甲酸铵水溶液-甲醇(75：25)，柱温室温，检测波长210nm。供试品液的制备：精密吸取样品液30ml,置于分液漏斗中,用浓氨水调节pH至10.5左右,用乙醚提取5次,每次20ml,提取液回收乙醚至干,残渣加流动相溶解,定量转至5ml量瓶中,流动相定容,摇匀,即得供试品溶液。
董海荣等测定咳欣康片中盐酸麻黄碱的含量。采用色谱柱为岛津Shim -pack VP-ODS柱(150mm×4.6mm,5μm ), 带有前置保护柱进行分离。检测波长210nm，流动相为乙腈-磷酸-三乙胺-水(3∶0.1∶0.1∶97)，柱温为室温。供试品溶液的制备: 取本品20片, 除去包衣,研细, 称取约1.5g, 置具塞锥形瓶中, 精密加入氯仿50mL 和浓氨试液3mL,超声处理30min, 放冷, 再称定质量, 用氯仿补足减失的质量, 摇匀, 滤过。精密量取续滤液25mL, 用0.05 mol/L 盐酸溶液振摇提取2次(30、30mL),合并盐酸萃取液, 用浓氨试液调节pH值至11, 加入氯化钠3g, 搅拌使溶解, 用乙醚振摇提取3 次(25、25、25mL ) , 合并乙醚液, 加入1% 盐酸甲醇溶液8mL,搅拌均匀后水浴蒸干,残渣加50%甲醇溶解。
肖幸华等测定麻苯滴鼻液中盐酸麻黄碱和盐酸苯海拉明的含量。采用色谱柱Spherisorb CN 柱(5μm,4.6mm×150mm)，流动相：甲醇-1%醋酸水溶液(含0.1%三乙胺) (65：35)，柱温35℃，检测波长254nm。
二、薄层扫描法
一般为双波长扫描法：
①岛津CS-930型薄层扫描仪；薄层条件：薄层板为硅胶GF254；展开剂为氯仿-甲醇-浓氨水(20：5：0.5)；显色剂为茚三酮试液。扫描条件：反射锯齿双波长扫描, λS=520nm ,λR= 680nm；狭缝1.2mm×1.2mm；线性参数SX=3。
②日本岛津CS-910型薄层扫描仪；层析条件：薄层板为硅胶G加0.3mol/ L醋酸钠0.5%CMC-Na (1：3)；展开剂为正丁醇-乙醇-水(24：12：4)；显色剂为0.5%茚三酮乙醇溶液。扫描条件：双波长反射法锯齿扫描,λS=520nm,λR=700nm；狭缝1.25mm×1.25mm；CH=1；SX=3。
③Scanner 3 型薄层扫描仪；薄层层析条件：硅胶G板；以氯仿-甲醇-浓氨试液(20：3.5：0.6)为展开剂；显色剂为0.5%茚三酮乙醇溶液。薄层扫描条件：λS=440nm,λR=510nm。
供试品溶液的制备方法，一般以浓氨水、浓氨水-甲醇混合溶液提取，净化处理有用乙醚等萃取，或如：①取本品粉末约1g ,精密称定,置索氏提取器中,加浓氨试液3ml ,乙醇10ml 与乙醚20ml ,放置24 小时,加乙醚适量置水浴上加热回流,提取4 小时至生物碱提尽,回收溶剂,蒸干后残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。（党晓菊，“薄层扫描法测定蒙药五味甘露溶剂中麻黄碱的含量”中国民族医药杂志，2003，9 （2））。②取通宣理肺丸约6g,剪碎,精密称定,加碱性甲醇溶液(pH = 8～9) 20mL ,浸泡20min ,用玻棒捣细,超声处理10min 后,离心(约3000 转) 10min ,取上清液。药渣重复超声、离心两次,合并上清液蒸干。加饱和氯化钠溶液30mL 使溶解,用浓氨调pH 至9 ,乙醚提取4 次,每次15mL ,合并乙醚液,蒸干,残渣加甲醇适量溶解,滤过,用甲醇定容至5mL 量瓶中,摇匀,备用。（刘元瑞等，“薄层扫描法测定通宣理肺丸中盐酸麻黄碱的含量”中成药，2004，，26（4））。③取本品适量, 研细, 取10g精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入1mo l/L盐酸溶液50mL, 超声处理30min, 滤过, 弃去初滤液,精密吸取续滤液25mL,加6mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至12～13,加入氯化钠4g使溶解,加乙醚提取3次(20mL, 20mL, 10mL) , 提取液通过盛有4g无水硫酸钠的漏斗脱水, 挥干乙醚, 残渣加甲醇适量溶解, 定量转移至5 mL量瓶中, 摇匀即得。（高安成等，“双波长薄层扫描法测定麻姜颗粒中盐酸麻黄碱的含量”，西北药学杂志，2003，18（2））
三、分光光度法
一般为双波长分光光度法，测定波长为：λS=263nm，λR=241nm；λS=256.9nm，λR=301.0nm；λS=257nm，λR=302nm；λS=256.8nm，λR=300.6nm等。