莲子心为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn.的成熟种子中的干燥幼叶及胚根。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法,以莲心碱为对照测定其含量。文献报道的常用的含量方法为高效液相色谱法和分光光度法等。
一、 高效液相色谱法
2005版《中国药典》莲子心含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.015mol/L十二烷基磺酸钠溶液(取十二烷基磺酸钠0.41g加水100ml使溶解)-冰醋酸(56:43:1)为流动相,检测波长为282nm。理论板数按莲心碱峰计算应不低于2000。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过四号筛)约0.5g,精密称定,精密加入2%盐酸甲醇溶液25ml,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用2%盐酸甲醇溶液补足减失的重量,滤过。精密量取续滤液5ml,置10ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。
文献报道的比较少,一般采用药典方法,其它的现具体举例,如:张先洲等采用了高效液相色谱法同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱等3种生物碱的含量。采用338型高效液相色谱仪(美国Beckman), 配有110B双泵, 166检测器, 406控制器, 427积分仪。色谱条件:Ultrasphere Si 4.6mm×250mm柱;流动相为二氯甲烷-异丙醇-二乙胺(70:30:0.2); 流速1ml/min;检测波长282nm。在此条件下,回归方程为A = 29.43+ 4233.4C,r= 0.9993,线性范围4~32mg/L。莲子心药材用甲醇冷浸后超声提取。
寿国香等用离子对反相HPLC法测定莲子心药材中莲心碱的含量。采用日本Shimadzu LC-10A 高效液相色谱仪,SPD210AV紫外可见检测器。色谱条件: 色谱柱为日本TOSOH TSK-GEL -ODS280TM (10μm, 4.6mm×250mm );流动相为甲醇-水-冰醋酸-辛烷磺酸钠-乙酸钠( 55:45:0.6:10mmol/L:5mmol/L);柱温40℃;流速1mL/min;检测波长282nm。回归方程Y =6 698 659.95X - 2 634.76,r = 0.999 9,样品在0.005~0.146 mg/m L范围内,线性关系良好。莲子心药材用盐酸-甲醇(2:98)混合溶液加热回流处理。
二、 分光光度法
用此方法测定莲心碱的含量,虽然报道较少,但是该方法简单、快速。如:胡学民等采用紫外分光光度法测定莲心碱的含量。莲心碱的最大吸收波长为282nm,对照品用无水乙醇溶解,回归方程为A=0.015+0.01746C,r=0.9999。样品的处理:莲心碱片的粉末用无水乙醇振摇提取,取续滤液。