木贼为木贼科植物木贼Equisetum hiemale L.的干燥地上部分。2005版《中国药典》收载的含量测定方法是以山柰素为指标,采用高效液相色谱法测定。
文献报道的测定木贼中山柰素的含量报道较少,现在介绍如下:
一、高效液相色谱法
2005版《中国药典》木贼含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长为365nm。理论板数按山柰素峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.75克,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液20ml,加盐酸5ml,置水浴中加热水解1小时,放冷,转移至50ml量瓶中,加75%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
孙斌等测定了沙棘籽渣中中槲皮素、山奈素、异鼠李素的含量。采用Kromasil C18(4.6mm×250mm,5mμ)色谱柱(Eka chemicals AB S-445 80 Bohus,Sweden),流动相为甲醇-水(60:40),柱温为室温,检测波长为368nm,流速为1.0mL/min。
刘耀明等对山蜡梅颗粒中的槲皮素及山柰素进行了含量测定。色谱柱:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, Nova-pak Cl8(3.9mm×150mm,4μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸(45:55);流速:1mL/min;柱温:35℃;检测波长:365nm;理论塔板数按槲皮素峰计算不低于1500。山柰素在2.16μg/mL~34.60μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),. 平均回收率为97.75%,RSD为1.53%。样品处理:甲醇回流提取,提取液蒸干,加水3OmL,加冰醋酸调pH3~4,加醋酸乙酯振摇5次。
二、胶束电动毛细管色谱法
余佳红等以超临界流体革取(SFE)银杏叶粗提物中槲皮素和山柰素,以胶束电动毛细管色谱法(MECC)测定这两种成分的含量。采用正交设计法考察SFE提取工艺,SFE条件:压力42mPa;温度60℃:静态萃取时间4min{动态萃取体积4mL;改性剂0.2mL乙醇。MECC条件:空心熔融石英毛细管柱(55cm×75μm);缓冲藏为磷酸二氢钠-硼砂=25-6.25mmol/L(pH8.5)SDS 35mmol//L;检测波长254nm。结果:SFE时改性剂对萃取效率的影响最大;MECC以肉桂酸为内标,在21.2~106.0μg/ml和2O.O~100.0μg/m1范围内,槲皮索和山奈素均呈良好的线性关系和重现性。4O,60和80μL槲皮素的加样回收率分别为93.87%,94.02%和94.10%;4O,60和80μL山奈素的加样回收率分别为94.5O%,94.17%和94.25%。