楮实子为桑科植物构树[Broussonetia papyrifera(L\')Vent.的干燥成熟果实,在中国分布广泛 ,具有补肾清肝、明目、利尿的功效,临床上用于治疗腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目昏、目生膜、水肿胀满,还可以治疗顽癣、神经性皮炎、湿疹等皮肤病,《名医别录》载为上品 。楮实子不仅具有开发治疗老年性疾病新药的潜力,还可以制成美容保健类的产品。
目前关于楮实子油化学成分方面的研究很少,为探讨楮实子的活性成分,本文首次对油中含量较高的亚油酸作了绝对含量分析和脂肪油技术指标的测定,并利用气相色谱-质谱仪对其他成分作了分析,为此类产品的开发及其衍生物的研究提供科学依据。
1 材料和方法
1.1 材料和仪器:晒干后的楮实子果实由湖北省药材公司提供。
1.2 方法
1.2.1 气相色谱分析条件:HP 6890A气相色谱仪。sE-30弹性石英毛细管柱,柱长30 m,内径0.25 mm,检测器FID,温度50cc至290oC,升温速率4℃/min,柱前压5 psi,分流比30:1,载气为高纯氮气。
1.2.2 气相色谱/质谱联用分析条件:HP 6890A气相色谱/HP 5973MSD色质联用仪。色谱条件:sE-30弹性石英毛细管柱,柱前压5 psi,柱长30 m,内径0.25 mm,初始温度50% ,升温速率6℃/min。,终止温度290℃;质谱条件:电子能量70 eV,离子源温度230oC,扫描范围35~650 u,扫描时间1.30 s,分辨率1 000。WILEY质谱数据库 。
1.2.3 楮实子油制备:取干果碾碎后过20目筛,按 (样品):W(石油醚)=1:10的比例用石油醚浸泡24 h后渗漉,回收渗漉后的溶剂即得楮实子油,得油率为43.6%。
1.2.4 楮实子油质量检验方法:相对密度、折光率和干燥失重的测定参照文献[8]的方法进行。
1.2.5 对照品和样品溶液制备:精密称取亚油酸40 mg,加三氟化硼甲醇溶液1 mL,在60℃水浴中酯化5 min,放冷,精密加入正己烷2 mL,振摇,分层后取上层液为对照品。准确吸取楮实子油0.5mL,加入 (乙醚):V(正己烷)=2:1:2.5 mL,甲醇2.5 mL.0.8 mol/L KOH甲醇溶液2.5 mL,摇匀,静置10 min,用蒸馏水定容至25 mL,取上层脂肪酸甲酯,经无水硫酸钠干燥,即可进样分析 。
1.2.6 标准曲线制作:分别取对照品1.0、1.5、2.0、2.5和3.0μL进样测定,以峰面积y与亚油酸含量 进行回归分析。回归方程Y=2 498 651X+917 231,r=0.999 6。
1.2.7 精密度、重现性、稳定性及回收率试验:均采用国家标准“动植物油脂肪酸甲酯气相色谱分析”(T 17377—1998)方法进行。
1.2.8 样品溶液的测定:样品溶液测定方法同标准曲线。同时平行测定3批不同时间来源的样品。
2 结果和讨论
2.1 楮实子油的理化性状
楮实子油的折光指数(2O℃)为1.473 1~1.473 5,相对密度(20/20~C)为0.911 7—0.914 0,干燥失重小于1% 。3批样品中的亚油酸含量分别为51.38% 、51.26%和51.15% ,平均含量为51.26% 。pH(16.2℃)5.5O~5.78,外观性状为棕色液体,具有浓油香味。
2.2 楮实子油的化学成分及含量分析结果
楮实子油的化学成分及含量分析结果见表1。用气相色谱外标法测定楮实子油的绝对含量及部分技术指标,用气相色谱/质谱联用仪测试了相对含量,结果表明,其绝对含量比相对含量低17个百分点,被鉴定的27个化学成分占总含量的95.91% ,另有17个化学成分没有被鉴定出来、,占总含量的4.09%。进一步的研究将把楮实子油用于降血酯试验,为把楮实子油开发成为治疗心血管病类的药物提供可靠的数据 。
在中国楮实子野生资源丰富,且含油高,得油率达到40%以上。油脂中含有丰富的不饱和脂肪酸,药材市场购买价格比较低,具有较强的市场开发潜力。