[摘要]目的:建立康胃泰胶囊中黄芪甲苷的含量测定方法,为控制康胃泰胶囊的质量提供依据。方法:样品经薄层层析、15%硫酸乙醇溶液显色后,λs=520nm,λ R=680nm波长处扫描测定。结果:样品的平均回收率为98.27%,RSD=2.41。结论:本法可作为康胃泰胶囊中黄芪甲苷的定量方法。
[关键词]黄芪甲苷;康胃泰;薄层扫描
慢性胃炎是一种常见病,其发病率在符种胃病中居首位。随着经济的发展,生活节凑的提高,慢性胃炎的发病率逐年增高。我院自行研制的康胃泰胶囊经过临床多年使用,治疗慢性胃炎效果显著,本研究用薄层色谱法对康胃泰胶囊中的黄芪甲苷进行定量,为康胃泰胶囊的质量控制提供了可靠的依据。
1 仪器与试药
CS-9000型薄层扫描仪(岛津),定量毛细管(美国DRUMMOND公司),硅胶GF254预制板(青岛海洋化工厂),FA1004电子天平(上海天平仪器厂),中药材购自哈尔滨市医药公司,康胃泰胶囊由本院制剂室提供,所用试剂均为AR级。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 供试品溶液的制备 精称供试品粉末10g,置带塞三角瓶中,加甲醇80ml,超声提取30min,过滤,残渣分两次各加甲醇40m1分别超声提取15min,合并提取液,州收甲醇,残留物加水约35ml,用水饱和的正丁醇苹取5次,每次30ml,合并正丁醇萃取液,用0.1mo1/L的氢氧化钠溶液提取3次,每次50ml,弃掉碱液,用饱和正丁醇的水液提取2次,每次50ml,弃掉水液,减压I山收正丁醇至尽,残留物加水lOm1分次溶解,通过D1O1型大孔树脂柱(1.5cmX 12cm,上部加中性氧化铝2.5g),用水50ml沈脱,介掉水液,再用15%乙醇50ml洗脱,弃掉该洗脱液,继用70%乙醇60ml洗脱,并收集70%乙醇洗脱液,蒸干后,残留物用甲醇溶解,并定容于5ml量瓶中,稀释到刻度,摇匀,作为供试品溶液 。
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成lmg/ml的溶液,作为对照品溶液。
2.1.3 空白样品溶液的制备 按康胃泰胶囊的处方和制备工艺,制备仅缺黄芪的药材阴性对照品,作为空白样品溶液。
2.2 薄层色谱和扫描条件
吸取上述供试品溶液、对照品及空白样品溶液各2μ1分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(13:7:2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以15硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,日光下显相同的棕褐色斑点,空白对照无此斑点。
黄芪甲什薄层色谱斑点经扫描在52Onm处有最大吸收峰,在650nm处无吸收。故选用双波长反射法锯齿扫描。 λλs=520nm。ΛR=680nm,狭缝1.25nmX 1.25nm,灵敏度:中。
2.3 线性关系考察 精密吸取对照品溶液(1mg/ml)2,4,6,8,lOμl分别点于同一薄层板上,按试验条件展开,显色,扫描测定,测其峰面积。以点样最对色谱峰面积进行回归,结果表明,黄芪甲苷在2.0~10.0线性关系良好,其回归方程为:Y=576.48X4585.36 r=O.9993(n=5)
2.4 回收率试验 精密称取已知含量的同一批号样品,分别粘密加入一定量黄芪甲苷对照品,按上述方法进行测定。
2.5 样品测定 取三批样品,同法测定样品中的黄芪甲苷的含量。
2.6 稳定性试验将样品三批,在37℃~40℃、相对湿度过75%的条件下保存,每lmo考察1次,连续3mo,结果本品性状、鉴别、相对密度、卫生学检查及含量测定均符合规定。
3 讨论
本试验用双波长薄层扫描法测定康胃泰胶囊中黄芪甲苷的含蹙,方法简单稳定,重现性好,浸板显色均匀,灵敏度高,可有效地控制康胃泰胶囊的质量。