蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans Cantor 或黑眶蟾蜍Bufo milanostictus Schneider的干燥分泌物。2005版《中国药典》一部采用高效液相色谱法测定华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。
2005版《中国药典》蟾酥含量测定项下：
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈（50：50）（用磷酸调节pH值为3.2）为流动相；检测波长为296nm。柱温40℃。理论板数按华蟾酥毒基峰、脂蟾毒配基峰计算应分别不得低于4000。
供试品溶液的制备：取本品细粉约25mg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20ml，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
文献报道的方法：
罗兴平等测定强力救心滴丸中华蟾蜍毒基和酯蟾毒配基的含量，采用HPLC法，LC-10AT高效液相色谱仪；Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(50：50) (用磷酸调pH值为3.2)；检测波长296nm。
王伟等测定梅花点舌丸中华蟾蜍毒基含量，采用双波长薄层扫描法，岛津CS - 930型薄层扫描仪(日本)。层析条件：硅胶GF254板，展开剂为氯仿-丙酮-环己烷(3：3 ：4) 。扫描条件：λS = 295nm ,λR =370nm；双波长反射法锯齿形扫描,外标二点法,SX= 3 ,狭缝为1.2mm×1.2mm。样品以氯仿为提取溶剂。
