清开灵注射液处方为:胆酸,珍珠母(粉),猪去氧胆酸,栀子,水牛角(粉),板蓝根,黄芩苷,金银花。
2005《中国药典》清开灵注射液含量测定项下:
胆酸
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水-磷酸(35:65:0.1)为流动相;检测波长为192nm。理论板数按胆酸峰计应不低于5000。
供试品溶液的制备:精密量取本品10ml,加稀盐酸0.5ml,用乙酸乙酯振摇提取4次(20ml,20 ml,15 ml,15 ml),合并乙酸乙酯液,回收至干,残渣加60%乙腈使溶解,转移至25ml量瓶中,加60%乙腈至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
栀子
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(10:90)为流动相;检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计应不低于3000。
供试品溶液的制备:精密量取本品20ml,置具塞锥形瓶中,精密加入磷酸溶液(1→3)1ml,置2~10℃放置1小时,取出,防至室温,离心(每分钟3000转)20分钟,精密量取上清液5ml,置50ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
黄芩苷
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相;检测波长为276nm。理论板数按黄芩苷峰计应不低于3000。
供试品溶液的制备:精密量取本品1ml,置100ml量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
以胆酸为指标的:
常增荣等用HPLC法测定清开灵注射液中胆酸的含量,采用岛津LC-10A高效液相色谱仪,色谱柱为C18,YMC-Pack ODS-A(5μm,4.6mm×150mm),流动相为乙腈-水-磷酸( 35:65:0.1),流速1.1mL/min ,检测波长192nm,柱温40℃。结果胆酸的平均回收率为97.63%,RSD为1.73%。
以黄芩苷为指标的:采用HPLC法时,常用的流动相系统为甲醇-水-磷酸和甲醇-水-冰醋酸。采用薄层扫描法时,固定相为硅胶GF254板,展开剂为正戊醇-甲醇-甲酸-水系统;一般为双波长反射锯齿法扫描,λS=290nm,λR=350nm。另外唐小明采用紫外分光光度法测定清开灵注射液中黄芩苷的含量,以6mol/L盐酸沉淀清开灵注射液中的黄芩苷,70%乙醇溶解沉淀后测定其在276nm的吸收度。
以栀子苷为指标的:王京辉等采用反相高效液相色谱测定清开灵注射液中栀子苷的含量,HP 1100 高效液相色谱仪,色谱柱为C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(10:90),流速0.5mL/min,检测波长238nm,柱温25℃。荀雅书等用薄层扫描法测定清开灵注射液中栀子甙的含量,测定波长为240nm,参比波长为310nm,狭缝为1.2mm×1.2mm,SX=3。