天麻为兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎。收载于2005版《中国药典》一部中，含量测定方法为高效液相色谱法，以天麻素为对照品。文献报道的方法主要有高液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法等。
一、 高液相色谱法
⑴2005版《中国药典》天麻含量测定项下
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05%磷酸溶液（3：97）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按天麻素峰计算应不低于5000。
供试品溶液的制备：取本品，在80℃减压干燥，粉碎，取粉末（过四号筛）约0.8克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，加热回流提取3小时，放冷再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液10ml，浓缩至近干，残渣加乙腈-水（3：97）混合溶液溶解，转移至10ml量瓶中，并用乙腈-水（3：97）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
⑵文献报道的HPLC法
马涵涛等采用HPLC法测定脑康泰颗粒中天麻素的含量。日本岛津LC一1OAT 高效液相色谱仪，SPD-10A 紫外检测器，C-R6A 型处理机。色谱柱：Shim-pack CLC-ODS(150mm×6.0mm)，流动相：甲醇-磷酸盐溶液(0.1mol／L NaH2P04溶液和0.1 mol／L Na2HPO4溶液等量混合)-水(3：7：98)，检测波长270 nm，柱温：4O℃，流速：0.8 mL／min。徐自升等采用HPLC测定天舒滴丸中天麻素的含量。Agilent 1100 HPLC仪，四元泵，DAD紫外检测器，全自动进样器，惠普化学工作站(HPCHEM)；流动相：A泵：0.1％磷酸水；B泵：0.1％磷酸甲醇。0～15min，B％：3.0％～7.0％ ；15～30min，B％：7％～100.0％；30～35min，B％ ：100％～0％ ；后运行5min。流速为1.0Ml/min，梯度洗脱。柱温为25℃，检测波长为221nm。虽然关于天麻素的含量测定方法已经多有文献报道，但大多用的是等度洗脱法。由于天麻素的极性很大，流动相势必含水量很大，这样就容易导致色谱柱塌陷，而引起柱效下降，柱子寿命变短。徐自升等使用的方法为梯度洗脱法，可将吸附在柱子上的脂溶性杂质及时洗脱，对保持柱效有很大的帮助。所选用的Lichrospher C18 2C系列的柱子，有较好的耐水性。
文献报道的流动相系统除药典收载的外，主要有：甲醇-磷酸盐溶液-水、乙腈-水-磷酸、甲醇-水-三乙胺系统等，检测波长多为270nm、22lnm、220nm等。
二、 薄层扫描法
熊慧林等测定了天麻杜仲胶囊中天麻素的含量。采用岛津CS-9l0型薄层扫描仪，大连物化所DW-95色谱工作站，瑞士CAMAG薄层自动涂布器。硅胶G板，展开剂：醋酸乙酯-甲醇-水(9：1：0.2)，显色剂：5％磷钼酸乙醇溶液，波长为600nm，单波长线性扫描。样品用甲醇超声处理。
三、 分光光度法
双波长扫描法：申玉华等测定了天芎头痛宁胶囊中天麻素的含量。采用CS-930薄层扫描仪，硅胶G薄层板，以氯仿-甲醇-醋酸乙酯（6：2：0.15）为展开剂，10%的磷钼酸乙醇溶液为显色剂，测定波长540nm，参比波长475nm。样品以无水乙醇提取，残渣用正丁醇溶解，经水提取和氧化镁吸附，排除了水溶性杂质的干扰。
二阶导数分光光度法：何丹鸿等测定了复方天麻头痛口服液中天麻素含量。采用岛津UV260型分光光度计(日本)。在200nm～250nm波长范围内，零阶吸收光潜时，处方中的其它成份对天麻索的测定有干扰；二阶导数吸收光谱时，天麻索在233nm波长处有一导数吸收峰，在此波长处其它成份无干扰。因此选233nm波长、用基线一峰法量取振幅值D，作为定量信息测定天麻素的含量。在5～25μg／mL浓度范围内，线性关系良好。
三阶导数分光光度法：袁曦等测定了复方天麻口服液中天麻素的含量。采用岛津UV260型分光光度计(日本)。在2O0～25Onm波长范围内，处方中其他成份有吸收，对天麻素测定有干扰；采用三阶导数法天麻素在229nm波长处有一吸收峰，235nm波长处有一吸收谷，其它成份在此波峰、波谷处无吸收，故选用229nm～235nm波长之间的振幅值作为测定天麻素的定量信息。