银杏叶提取物具有抗苗消炎、抗衰老、拮抗血小扳活化因子(PAF)等作用,已经引起生世界的广泛注意。近年来对银杏叶提取物中总黄酮含量的测定多有报道E2-33。事实验以不同溶媒及方法提取银杏叶。并用紫外分光光度法对各批银杏叶粗提物中的芦丁含量进行了初步鉴定。
1 材料和仪器
银杏叶.1999-10采于湖北竹溪t由湖北省十堰市药捡所鉴定;芦丁标准品,由中冒药品生物制品检定所提供。日本岛津公司UV-2201全自动紫外可见光分光光度计。本实验所用试剂均为分析纯或化学纯,水为纯化水。
2 提取物的制备过程
粉碎的干叶,60%丙酮提取,提取液碱压浓缩,离心除沉淀,上清液用有机溶媒萃取,萃取液浓缩干燥,得提取物。
粉碎的干叶,7O%乙醇提取.提取液减压浓缩,浓缩液加入到饱和的D-101吸附树脂(天津农药厂)塔中,用水洗至流出液无色,洗涤后的吸附树脂用乙醚解吸,解吸液浓缩干燥,得提取物。
3 芦丁的含量测定
3.1 标准曲线的制备 精密吸取0.157mg/ml的芦丁标准液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml,分别置于l0m1容量瓶中,用30%乙醇稀释至刻度,在250nm波长处作紫外检测。回归方程为C=0.3216A十0.0007,相关系数r=0.999 4。
3.2 回收率用标准加入法测定紫外检测的回收率。
3.3 测定样品芦丁含量 精密称取样品一定量,置50ml容量瓶中用30%乙醇稀释至刻度,再精密量取1ml,置10ml容量瓶中,用30%乙醇稀释至刻度,按标准曲线同样条件作紫外检测。由标准曲线计算芦丁量.并计算含量。
4 讨论
标准曲线及回收率测定结果表明,用紫外分光光度法测定,芦丁能定量回收 且方法简便,精密度尚好比较两种溶媒提取方法,初步发现,以含水的丙酮提取幼树银杏叶,产品得率较好;而以含水的乙醇提敢.芦丁含量更高。另外,除芦丁等黄酮类化台物外,银杏叶提取物中坯含有能拮抗血小板活化因子(PAF)的银杏叶内酯,其快速而准确的检测方法尚有待于探讨。