玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的干燥根。2005版《中国药典》以哈巴俄苷为指标,采用高效液相色谱法测定含量。有关玄参极其制剂的含量测定报道较少,一般采用药典规定的高效液相色谱法。
2005版《中国药典》玄参含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以1%醋酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为278nm。理论板数按哈巴俄苷峰计算应不低于5000。
0~20分钟,流动相A(%):20→50,流动相B(%):80→50
供试品溶液的制备:取本品中粉约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加30%甲醇50ml,密塞,称定重量,浸泡1小时后,超声处理(功率500W,频率40KHz)30分钟,放冷,再称定重量,用30%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
王桂华等用HPLC测定了玄参不同加工品中哈巴俄苷与肉桂酸的含量。高效液相色谱仪(美国Beckman公司),126双流泵,167可变紫外检测器;色谱柱为Beckman公司ULTRA-SPHERE 5μODS预备柱(45mm×4.6mm)与分析柱(250mm× 4.6mm),流动相为乙腈-1%醋酸水溶液线性梯度洗脱(20:80→50:50)(20 min),流速lml/min,检测波长278nm,理论塔板数按哈巴俄苷峰计算不低于10000。哈巴俄苷在1.23
~104.2μg/ml范围内呈良好线性关系。样品提取方法为甲醇水(30:70)超声提取3Omin。
冯品光等以高效液相色谱(HPLC) 法进行玄参中哈巴俄苷的含量测定。甲醇-1%冰醋酸(60:40)为流动相;检测波长为278nm。理论板数按哈巴俄苷峰计算应不低于6000。