大黄的有效成分为大黄素、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚及其甙类等蒽醌类成分。有关大黄及其制剂有效成分含量测定方法报道很多，如比色法、薄层-紫外分光光度法、HPLC法等。这里简单介绍一下HPLC法测定大黄素含量时的色谱条件、样品处理方法等。
⑴、《中国药典》2005版大黄含量测定项：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1%磷酸溶液（85：15）为流动相。检测波长为254nm。对照品为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚。大黄样品前处理：甲醇回流提取—8%盐酸超声—三氯甲烷回流萃取。
⑵、王曙东，费建红，腾英博，谢虞异，陈安兰采用HPLC法测定了升血灵片中大黄素的含量。色谱条件同⑴，检测波长：439nm。仪器：1525-2996高效液相色谱分析仪(美国Waters公司)柱Lichrospher C18(150 mm×4.6mm，5μm)。
⑶、李长新，苏德龙，刘相辉，张 强，李桂红，国晶采用HPI C法测定养血安神糖浆中大黄素含量，色谱条件同⑴，检测波长436nm。仪器：Dynamax UV-D Ⅱ紫外检测器；Dynamax SD-200泵；Dynamax色谱工作站。
⑷、周静安，徐玲笑采用RP-HPLC法测定苁蓉通便口服液中大黄素的含量，色谱条件同⑴。在样品处理时分别采用以下方法进行比较：① 乙醚萃取法；②通过D101型大孔树脂柱吸附法；③ 甲醇沉淀杂质法，对同一批号的苁蓉通便口服液进行提取、分离，并按含量测定方法测定供试品溶液中大黄素的含量。结果3种方法测定结果相差不大，而以乙醚提取法峰形较好，杂质干扰少，且基线平稳。虽然将样品采用通过D101型大孔树脂柱吸附法测定大黄素的含量结果与乙醚提取法相似，但该方法样品提取操作方法烦琐、费时。用甲醇沉淀杂质法，虽然方法简单，但杂质沉淀不完全，图谱中杂质峰响应值过大。故采用乙醚萃取法，操作方便，结果准确可靠。
⑸、黄园,张志荣,邹敏采用HPLC法测定黄桔胶囊中大黄素的含量。流动相：甲醇-水-高氯酸(80：20：0．1)，流速1.3mL／min，检测波长286nm，柱温：35℃ 。仪器：日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，shimpackCLC-ODS(150mm×4.6mm id 5 )色谱柱。样品处理时曾用甲醇-盐酸回流法提取总大黄素后直接进样，但样品峰始终有明显干扰，不能较好分离。故采用甲醇提取，盐酸水解，乙醚萃取的方法提取总大黄素，样品峰得到较好分离。
⑹、朱丽，刘向前采用HPLC法测定益龄精口服液中大黄素的含量。流动相：乙腈-水-冰醋酸(60：40：1)；检测波长：437nm；样品处理参照《中华人民共和国药典》2000年版一部更年安片项下含量测定方法.
HPLC法单独测定大黄素的含量时，文献报道所采用的色谱条件多为药典所载的条件。流动相为甲醇-磷酸系统，也有用乙腈-磷酸系统的；检测波长多为254nm，其它的多为上面介绍的。文献报道的大黄中蒽醌衍生物的提取方法多为将样品用适当溶剂回流提取，除去溶剂后氧化水解，再以有机溶剂萃取。酸溶液多为盐酸和硫酸。