摘要：试验选择临床表现血瘀症状的产后病牛进行生化和血液流变学指标检测。结果：与健康奶牛产后8～10 h相应值比较，病牛血清WOD活性、血糖、血浆总蛋白、球蛋白含量显著降低(P＜0.05)，淀粉酶活性、白蛋白 和血红蛋白含量差异不显著(P＞0.05)；全血比粘度、还原全血比粘度、 血浆比粘度、红细胞聚集指数及血浆纤维蛋白原含量显著升高(P＜0.005 或0.01)，全血凝固时间显著缩短(P＜0.05)，而红细胞压积无明显变化 (P＞0.05)，临床症状与生化、血液流变学主要指标变化基本相符，据此初步提出了奶牛产后气虚血瘀证诊断标准。
关键词: 奶牛；气虚血瘀证；诊断标准
气虚血瘀证是指机体脏腑功能下降(衰退)而出现全身虚弱症状，同时伴有血行不畅，甚至停滞凝聚或离经之血积于体内，影响气血运行所产生的各种临床表现的总称。奶牛产后气虚血瘀证为临床常见病症之一，多发于奶牛难产、胎衣不下、产道损伤、恶露不尽等疾病过程中，并为上述病症发生的基础。1986年全国中西医结合虚证与老年病专业委员会制订了“中医虚证参考标准”，同年第二届全国活血化瘀研究学术会议修订了“血瘀证诊断标准”，并指出：临床兼证，如气虚血瘀、气滞血瘀、痰阻血瘀或寒凝血瘀等证，可根据中医理论及其他有关标准进行辨证，作出兼证诊断。此后，中医专家据此对心血管病气虚血瘀证，晚期非小细胞癌患者气虚血瘀证等进行了深入、广泛的研究，并探讨了中药方剂对气虚血瘀证的作用机理，但未见有关产后气虚血瘀证的研究报道。在中兽医方面，对家畜血瘀证及活血化 瘀证治则的研究有一些报道，而利用生化和血液流变学技术进行母畜产后气虚血瘀证的诊断标准研究尚未见报道。本试验在参考中医气虚证和血瘀证诊断标准的基础上，根据奶牛生产实际，提出了临床症状结合生化和血液流变学指标诊断奶牛产后气虚血瘀证的方法，现予报道。
1 材料与方法
1.1 试验动物选择北京黑白花奶牛，由北京市通州区国营渠头奶牛场提供，产后健康牛12头，2～4胎龄，营养中等，体质中等，产程顺利，犊牛健康，胎衣在产后8～10 h内排出，临床检查未见异常。 产后病牛9头，产后8～10 h检查，其气虚证临床症状选择标准为：精神沉郁，营养中下等， 体倦乏力、嗜卧，食欲显著降低，采食量2～5 kg/次，舌软无力，大便稀泻，肛门松弛，脉弱无力等。血瘀证临床症状选择标准为：阴道、阴门黏膜血肿，中度肿胀外翻，胎衣在产后 8～10 h仍未完全排出，或发生难产，或助产致阴门、阴道损伤、撕裂。
1.2 采样 产后8～10 h颈静脉采血，5 ml/头，肝素抗凝(30 u/ml)。另每头采血2 ml于试管内，自然凝固，取血清备用。
1.3 指标及测定方法
1.3.1 临床观察指标 主要观察奶牛精神、体况、被毛、食欲、粪便、舌色、鼻镜、阴门、眼结膜、耳温及脉搏等。
1.3.2 生化指标 血清超氧化歧化酶(SOD)活性：黄嘌呤氧化法。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。按试剂盒规定的方法操作。血清淀粉酶(α-Amylase)活性：碘比色法。试剂盒由北京柏定生物工程公司提供。血糖(GLU)含量：分光光度法。试剂盒由北京柏定生物工程公司提供。按试剂盒规定的方法操作。血红蛋白(Hb)含量：HICN氏法 (氰-高铁血红蛋白法)。BC941型溶血剂，由北京埃尔码医用仪器有限公司提供。血浆总蛋白 (TP)、白蛋白(ALB)：比色法。均按试剂盒规定的方法进行操作。血浆纤维蛋白原含量(FG) ：比浊法。试剂盒由北京市第六人民医院提供，按试剂盒规定的方法操作。血浆球蛋白(GLOBIN)含量：计算。血浆球蛋白(g/l)=总蛋白-白蛋白-纤维蛋白原。
1.3.3 血液流变学指标 全血比粘度(ηb)： 水平型毛细管测定法,仪器为上海医科大学生产的LING-100型毛细管式血液粘度计,测试温度为37 ℃， 参比液为生理盐水， 切变率分别为ηb20S-1和ηb80S-1。 血浆比粘度(ηp)： 垂直型毛细管测定法。将抗凝血以2 500 r/min离心10 min， 取血浆进行测定。 红细胞压积容量(PCV)： Wintrobe压积管法， 3 000 r/imin离心30 min。全血凝固时间(CT)：试管法。 全血还原比粘度(ηr)=全血比粘度-1红细胞压积.因本试验测定了低切和高切两个切变率的全血比粘度，因此，也计算出低切和高切两个全血还原比粘度。红细胞聚集指数(Al)=(全血低切比粘度全血高切比粘度.
1.4 生物统计方法 对产后健康牛与病牛各项指标测定结果用SAS(Statisrical Analysis Syestem)软件进行处理。
2 结果
2.1 气虚血瘀证气虚指标测定结果 结果显示，气虚血瘀证组SOD活性、血糖含量、血浆总蛋白、球蛋白均显著低于产后健康组(P＜0.05)，而淀粉酶活性、白蛋白和血红蛋白无显著差异P ＜0.05)。见表1。
2.2 气虚血瘀证血瘀指标测定结果 试验结果显示，气虚血瘀证奶牛与产后健康组相比，全血比粘度、全血还原比粘度极显著升高( P ＜0.01)，红细胞聚集指数、血浆比粘度及纤维蛋白原含量显著升高 (P＜0.05)，全血凝固时间显著缩短( P ＜0.05)，而红细胞压积虽有升高趋势，但差异不显著(P ＜0.05)。见表2。
3 讨论
3．1 奶牛产后气虚血瘀证临床症状分析 奶牛产后气虚血瘀证主要是由于母牛妊娠期间饲养管理不良，营养不足，体质衰弱，以至气血虚亏，或因胎位不正，分娩时间过长，用力过度，亡血伤津，气随血耗，无力排出胎衣或胎犊，从而发生胎衣不下或难产。母畜元气亏损，脾气不足，因此出现精神沉郁，食欲降低，舌软无力，大便稀泻甚至排出水样粪便等气虚症状。气为血帅，气行则血行，气虚则无力推动血液运行，血流不畅而成瘀，可见阴道黏膜血肿，呈暗紫色，阴门肿胀外翻。尤其在家畜发生难产时，助产手臂反复刺激阴道黏膜，或强行拉出幼犊，造成阴门、阴道甚至子宫颈撕裂时，阴门血肿更为明显。
3.2 奶牛产后气虚血瘀证的气虚指标分析 现代医学中关于自由基、SOD与虚证关系的研究报道很多，基本上肯定了在发生虚证时，血液中O2-、OH-等自由基增加，而SOD活性下降，如陈曼珍等发现肾虚患者外周血细胞中SOD活性显著降低(P<0．01)，消除自由基能力明显减弱。欧敏等观察血虚证时，还发现在机体SOD活性降低，自由基含量增多的同时，机体ATP的来源受到障碍，新陈代谢降低。在气虚证研究方面，罗陆一、刘增印认为SOD活性降低可能是慢性肾炎肾气虚证的发病机理之一。另有大量试验证实，气虚证的实质是体内SOD等清除自由基系统功能下降，血液中自由基含量升高，破坏了线粒体膜脂层的形态结构，其合成ATP的效率降低，从而使机体出现一系列气虚症状。在本试验中，气虚血瘀证奶牛血液中SOD活性显著降低的同时，奶牛有明显的气虚临床症状，与上述研究结果相近。与产后健康牛相比，产后气虚血瘀证奶牛虽然食欲降低，食量减少，但血清淀粉酶活性未见显著降低，可能是由于胰腺未发生实质性病变；血糖浓度显著降低，可能是奶牛产生气虚血瘀证的重要原因。该结果与刘士喜等的研究结果一致；血浆总蛋白和球蛋白含量显著下降，说明机体蛋白质消耗过度，免疫机能下降。 综上所述，我们初步认为血清SOD活性和血糖含量显著降低可能是产后气虚证诊断的重要参考指标。
3．3 奶牛产后气虚血瘀证的血瘀指标分析 血液粘度是反映血液循环状况的重要标志之一。一般来说，血液粘度增高会导致血液流动性降低，引起血液循环障碍，从而影响组织器官氧的供给、养分的供给及代谢产物的排除，使机体处于病理状态 。本试验结果表明，产后气虚血瘀证奶牛全血比粘度显著升高，体内存在血瘀状态和微循环障碍。由于奶牛血液粘度升高，血流速度相对缓慢，造成血液微循环发生障碍，阴门、阴道等局部组织缺氧，水液积聚，因此奶牛出现阴门血肿，呈暗紫色等临床症状。进一步分析表明，奶牛产后气虚血瘀证全血比粘度的升高可能与红细胞聚集性增强及纤维蛋白原含量升高有关。
全血还原比粘度是指单位红细胞压积所产生的粘度，它排除了因红细胞压积不同所造成的粘度差异，可以较好地反映除红细胞压积以外，是否还有其它因素对粘度的改变产生了影响。 在本试验中，红细胞压积未发生显著变化，而还原全血高切比粘度、还原全血低切比粘度均显著升高，说明还有其它因素参与其中，本试验中全血比粘度升高可能与红细胞聚集性升高、纤维蛋白原含量增加有关。红细胞之所以能对血液粘度产生较大的影响，是因为红细胞能够形成“缗钱状聚集体”影响血液流动，导致血液粘度升高，在本试验中，红细胞聚集指数显著升高，表明红细胞表面负电荷量减少，细胞间排斥力减少，细胞间易聚集而成“缗钱状聚集体”，使血液粘度升高 。另一方面，产后气虚血瘀证奶牛血浆纤维蛋白原含量升高，通过其特殊的哑铃状分子结构，既可以直接导致血浆粘度升高，也促进了红细胞 “缗钱状聚集体”的形成，是导致奶牛产后气虚血瘀证全血比粘度升高的一个重要因素。
本试验结果表明，产后气虚血瘀证奶牛全血凝固时间缩短，这可能与血液粘度升高，血浆中纤维蛋白原增加有关。
综上所述，笔者认为血液比粘度显著升高和全血凝固时间缩短在临床上诊断产后血瘀证有重要参考价值。
4 结论 在借鉴中医关于气虚证和血瘀证诊断标准的基础上，本试验对奶牛产后气虚血瘀证现代诊断方法进行了探讨，结果表明，具有精神沉郁，食欲显著降低，大便稀泻，脉弱无力的气虚症状和阴门肿胀、外翻，产道损伤等血瘀症状的奶牛，表现为SOD活性、血糖、血浆总蛋白、 球蛋白显著降低；全血比粘度、还原全血比粘度、血浆粘度及纤维蛋白原含量显著升高。临床症状与生化、血液流变学指标变化基本相符，在此基础上，我们首次提出奶牛产后气虚血瘀证诊断标准。临床症状表现精神沉郁，嗜卧，体质瘦弱，营养中下，食欲显著降低，舌软无力，大便稀泻；阴门瘀血肿胀、外翻，曾伴发难产、胎衣不下或产道损伤。生化指标与产后健康牛相比，血清SOD活性、血糖含量显著降低；血液流变学指标与产后健康牛相比 ，全血比粘度显著升高，全血凝固时间显著缩短。
