盐酸克伦特罗(Clenbuterol)(β2—肾上腺素受体激动剂,简称β2—兴奋剂):俗称“瘦肉精”,能够改善动物养分的代谢途径,促进动物肌肉的合成,抑制脂肪合成的积累,即具有营养“再分配效应”,因此常被不法分子添加于动物饲料活饮用水中,以提高胴体瘦肉率,由于其易在脏器中积聚残留,并可通过食物链进入人体严重危害人类健康,轻则导致心跳及心律不正常,重则可引发心脏病。我国已经明确将其列入禁用药品目录。
为切实保障广大群众食品安全,我们在2006年底至2007初应用克伦特罗快速检验试纸法,对猪尿样进行了检测。
1、试材:
试纸由大连普瑞康生物技术有限公司研制,灵敏度2ppb。
2、样品来源:
抚顺市各大养猪场
3、反应原理:
①反应孔中包被结合了胶体金的瘦肉精抗体
②C线喷有对瘦肉精抗体专一的羊抗兔抗体, T线喷有瘦肉精抗原
③阳性反应:样品中瘦肉精高,瘦肉精抗原与反应孔中金标抗体结合较多,只有少量金标抗体会与T线上喷有的抗原结合,故成色较浅。
④阴性反应:样品中无瘦肉精,反应孔中金标抗体与T线上喷有的瘦肉精抗原结合,显色很深。
4、操作步骤:
①向反应孔中加一滴样品
②摇晃——回溶一分钟——摇晃——静置十分钟
③放一片快速检测试纸
④跑片五分钟
5、结果判读
在试纸片的‘中央判读区’喷有2条隐形的线,上面一条为对照线(C线),下面一条为测试线(T线)。若样品中克伦特罗的浓度小于2ppb,则T线呈色与C线相近;若样品中克伦特罗的浓度大于2ppb,则T线将比C线浅很多或完全看不到线,也就是说,克伦特罗浓度越高T线越浅。
6、注意事项
①存放时保持纸条及反应孔的干燥
②检测时反应孔中只能加一滴样品,切勿多加
③反应孔中加入样品后摇晃至少五圈,确保金标抗体的充分溶解
④判断结果时若C线未出线证明纸条已失效或检测样品有问题,需重新进行检测
7、讨论
操作方法简便快速,整个操作过程只需20分钟,我们利用该法检测猪尿样231个,假阳性率低于1.8%.该法作为筛选法,缩短了检测周期,增加了检验批次,此法更适用于普通实验室及现场。