鸡慢性呼吸道病(Chronicrespiratorydisease,CRD)是经呼吸道感染的接触性传染病，可水平和垂直传播，高度集约化、密集型的生产方式可加速本病的扩散，给养禽业造成巨大经济损失。CRD的预防目前尚无效果确实的疫苗，利用抗菌药物防治是目前国内外采取的主要措施，目前常用的药物有大环内酯类、四环素类、林可胺类抗生素及氟喹诺酮类等，其中许多药物由于价格或耐药性方面的问题，在生产上应用受到一定限制，而且使用单一的抗菌药不利于防治MG的混合感染及预防耐药性产生，合理的联合用药可以降低成本、提高疗效、减少耐药性。红霉素具有一定的抗支原体作用，磺胺嘧啶钠具广谱抗菌活性，甲氧苄啶对二者的抗菌作用均有增效作用，且价格低廉。本研究将其进行联合用药，对实验性鸡败血支原体病进行治疗试验，进一步验证这些药物在治疗鸡败血支原体感染中的协同作用。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂 复方红霉素，内含活性成分红霉素(10%)、磺胺嘧啶(16%)及甲氧苄啶(3.2%)，批号：D.015，对照药物硫氰酸红霉素、磺胺嘧啶钠及甲氧苄啶，均由印度尼西亚PT.SumberMultivita药 厂提供。胰蛋白胨为美国Difco公司产品；酵母浸出物为英国OXOID公司产品。其它试剂均为国产分析纯。
1.2 试验动物 7日龄新扬州鸡210只，购于扬州市区某鸡场。鸡试验前经血清学检测为阴性。用不含其他任何抗菌药物的全价饲料饲喂至21日龄。
1.3 菌种 禽败血支原体为S6株，由华南农业大学惠赠；禽大肠杆菌O78株，由扬州大学传染病学教研室提供。
1.4 培养基 FM-4改良培养基，参考Frey等的方法配制，用于禽败血支原体培养。
1.5 试验动物分组 将21日龄210只新扬州鸡，试验前单羽称重，随机分组，共7组，每组30只，即分别为高、中、低剂量治疗组、红霉素对照组、磺胺嘧啶(SD)/甲氧苄啶(TMP)对照组、健康对照组、感染对照组。各试验组鸡的平均体重和处理见表1。
表1 各组试验鸡处理及体重
1.6 鸡败血支原体与大肠杆菌人工混合感染 鸡败血支原体接种液为MGS6株第3次传代培养物，生长浊度为1×108CCU(颜色变化单位)/ml。另外，将保存的鸡大肠杆菌(O78)的强毒菌接种于普通平板，培养24 h后挑取典型菌落接种于营养肉汤中，37 ℃培养18 h后取出，肉汤培养物经接种鸡复壮后，从鸡肝脏分离出大肠杆菌并接种于平板培养，最后挑选典型菌落用营养肉汤培养制备染毒菌液。21日龄时各治疗组及感染对照组每只鸡经左右胸腹气囊接种鸡败血支原体液体培养物(105 CCU/ml)，0.2 ml/100 g。接种后48 h，每只鸡通过皮下注射接种大肠杆菌液体培养物(2.8×105CFU/ml)，剂量为0.08 ml/100 g。健康对照组注射无菌生理盐水。
1.7 给药方法 各治疗组鸡于接种大肠杆菌后即以饮水途径给予药物治疗(如表1)，每天配换药液一次，连续用药5天。健康及感染对照组给予常水。
1.8 临床观察 停药后观察期15天，每天观察各组鸡的临床症状，记录死亡情况。病死鸡剖检并进行细菌学分离。
1.9 疗效评价指标
1.9.1 死亡率 凡在试验期间，鸡出现败血支原体和大肠杆菌混合感染的典型症状并死亡，剖检气囊、肺脏、心脏、肝脏有典型的病理变化特征，肝脏、心脏分离出大肠杆菌，判定感染死亡。根据死亡鸡数计算死亡率。
1.9.2 治愈率 凡在试验期间，经饮水给药后精神状况及食欲恢复正常，不再出现咳嗽、呼吸罗音、打喷嚏、张口呼吸、流鼻涕等临床症状均属治愈。根据治愈鸡数计算治愈率。
1.9.3 有效率 用药后，试验鸡的精神、食欲、呼吸有明显好转，体重较用药前增加者，均判为有效，据此计算有效率。
1.9.4 增重 根据试验初和试验结束(感染后23天)时各组鸡的体重，计算每只鸡增重，据此计算每组试验鸡平均增重及标准差。
1.9.5 病理剖检和病原分离 试验结束后将所有存活鸡捕杀，并进行大肠杆菌分离培养。据此计算各组大肠杆菌分离率。
1.9.6 数据的分析处理 用生物统计学方法进行数据的显著性检验，其中死亡率、治愈率及有效率均用卡方检验，增重采用t检验。
2 结果 结果见表2。统计学分析表明，除高剂量组死亡率与中剂量组死亡率比较差异不显著外，高、中剂量组与其他用药组及感染对照组差异均显著(P＜0.05)。
表2 各药物对鸡败血支原体和大肠杆菌混合感染疗效(略）
复方红霉素高、中剂量组治愈率最高，达83.3%以上；红霉素组最低，仅为46.7%，其次为磺胺嘧啶/甲氧苄啶组，为63.3%。统计学分析表明，前两者的治愈率显著高于红霉素组与磺胺嘧啶/甲氧苄啶对照组(P＜0.05)。复方红霉素高剂量组有效率与红霉素组及磺胺嘧啶/甲氧苄啶组比较差异极显著(P＜0. 01)，与低剂量组相比，差异显著(P＜0.05)。但高、中剂量组间比较差异不显著(P＜0.05)。试验鸡增重以健康对照组最高，其次为高剂量组。统计学分析表明，除高剂量组外，各用药组与健康对照组的增重差异均显著(P＜0.05)。各用药组增重显著高于感染对照组(P＜0.05)。
3 讨论 治疗试验结果表明，复方红霉素以1 000 mg/l饮水给药组的死亡率显著低于药物对照组，治愈率、有效率均显著高于药物对照组。复方红霉素以500 mg/l饮水给药组的各项疗效指标与 1 000 mg/l组比较无统计学意义上的差异，混合感染后的大肠杆菌分离率亦明显下降。综合本实验各项结果可以看出，复方红霉素中的红霉素、磺胺嘧啶、甲氧苄啶合用在治疗鸡败血支原体和大肠杆菌混合感染方面有明显的协同作用，以500～1 000 mg/l饮水连续5天饮水给药疗效较好，其作用明显优于对照物红霉素组及磺胺嘧啶/甲氧苄啶组。同时，复方红霉素可溶性粉饮水给药使用方便，溶解迅速，对鸡无不良作用，饮、食欲正常，适口性良好，可作为鸡败血支原体和大肠杆菌混合感染时治疗的有效药物。
