近年来，湖南永州市规模化猪场相继出现了母猪受胎率低、妊娠期流产、产死胎、木乃伊胎、弱仔和仔猪死亡率高等现象，疫病的流行面和发病率有逐渐增加的趋势。为了弄清永州市规模化猪场引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原，制定有效的综合防制措施，笔者于2004年1月至2006年9月对永州市所辖的冷水滩、零陵、祁阳、东安、双牌、道县、江永、江华、宁远、蓝山、新田11个县(区)23个乡镇的36个规模化养猪场进行了流行病学调查，对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪圆环病毒病(PCV2感染)、猪伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)、猪细小病毒病(PP)、猪乙型脑炎(JB)、猪衣原体病、猪布鲁氏杆菌病、猪附红细胞体病、猪弓形虫病进行了血清学调查。
1 材料与方法
1．1 流行病学调查
以发病母猪的品种、受胎率、胎龄、胎次、流产率、死胎率、弱仔率等为指标对永州市规模化猪场进行随机抽样调查，同时调查猪场的防疫和饲养管理情况。
1．2 病料的样品采集
严格按照动物疫病实验室病料样品采集方法的相关规定，对永州市11个县(区)23个乡镇的36个规模化猪场出现繁殖障碍现象的母猪采集全血，并分离血清600份。
1．3 血清学检测所用试剂及检测方法
1．3．1 猪繁殖与呼吸综合征病毒检测 采用美国IDEXX公司生产的ELISA诊断试剂盒，对母猪血清进行相应的抗体检测。血清抗体判定标准是S／P≥0．4为阳性，S／P<0．4为阴性。
1．3．2 猪圆环病毒2型检测 运用上海生物工程公司合成的扩增引物，将待检血清用蛋白酶K消化法提取模板DNA，进行PCR扩增，扩增产物在0．8％的琼脂糖凝胶上电泳，溴化乙锭染色，在紫外光下观察，可见一个494bp的特异性片段，则判定为阳性。
1．3．3 猪伪狂犬病病毒检测 采用武汉科前动物生物制品有限责任公司生产的猪伪狂犬病gE鉴别ELISA诊断试剂盒，对母猪血清进行检测，可诊断母猪是否感染猪伪狂犬病野毒株。判定标准S／N≤0．6为阳性，S／N>0．6为阴性。
1．3．4 猪细小病毒检测 采用武汉科前动物生物制品有限责任公司生产的猪细小病毒乳胶凝集试验(LAT)诊断试剂盒，对待检血清进行相应的抗体检测。如被检血清出现“++”约50％乳胶凝集，判定为阳性，否则为阴性。
1．3．5 猪乙型脑炎病毒检测 运用武汉科前动物生物制品有限责任公司生产的猪乙型脑炎LAT诊断试剂盒，对待检血清进行相应抗体检测。如被检血清出现“++”约50％乳胶凝集，可判定为阳性，否则为阴性。
1．3．6 猪瘟病毒检测 采用中国农科院哈尔滨兽医研究所生产的ELISA诊断试剂盒，对待检血清进行相应的抗体检测。判定标准OD≥0．2为猪瘟弱毒抗体阳性，OD<0．2为猪瘟弱毒抗体阴性；OD≥0．5为猪瘟强毒抗体阳性，OD<0．5为猪瘟强毒抗体阴性。
1．3．7 附红细胞体检测 采用购自农业部兽医诊断中心的附红细胞体诊断试剂盒，将待检血清进行间接血凝试验(IHA)检测。如被检血清抗体滴度大于或等于1：80，可判定为阳性。
1．3．8 衣原体检测 将被检血清进行4倍递增稀释，连续稀释3孔，加入诊断抗原(购自中国农科院兰州兽医研究所)，37℃作用2h，判定结果，在对照均成立的情况下，被检血清抗体滴度1：64，出现“++”以上者判定为阳性。
1．3．9 弓形虫检测 采用日本荣研化学株式会社研制的弓形虫病LAT诊断试剂盒，对被检血清进行相应的抗体检测，抗体滴度大于或等于1：16，判定为阳性，抗体滴度小于1：16，判定为阴性。
1．3．10 布鲁氏杆菌检测 将被检血清做虎红平板凝集试验，所需抗原、标准阳性和阴性血清均由成都兽医生物药品厂提供。取被检血清和抗原各0．03mL，滴于玻板上，充分混匀，于4-10min内观察结果，如被检血清凝集出现“+”以上者判定为阳性，否则为阴性。
2 结果
2．1 流行病学调查
2．1．1 流行及发病情况 调查的11个县(区)23个乡镇36个规模化猪场的繁殖母猪，出现母猪繁殖障碍性疾病的猪场达100％，表1、表2显示配种母猪受胎率81．3％，妊娠母猪的发病率18．6％，以1胎母猪所占比例最大，占38．5％；在调查的6 450胎次中，发病率为36．1％，其中9 231头在出生时或一周内发病死亡，占产仔数的14．8％。上述死亡的仔猪或胎儿，有831头为流产或早产胎儿，占9．0％；有4883头(其中木乃伊胎711头)出生时就已死亡，占52．9％；有弱仔3 194头，占34．6％；畸形胎儿323头，占3．5％。全市11个县(区)母猪繁殖障碍性疾病较严重的依次为蓝山、冷水滩、道县、零陵，都高于本市母猪繁殖障碍性疾病的平均发病率。
2．1．2 母猪繁殖障碍与品种、体况、季节、饲养管理的关系 母猪繁殖障碍与品种、体况无关，但与季节及饲养管理情况相关，每年4-10月发病率明显升高，而其他月份相对较低；饲养管理不规范的猪场发病率较高，饲养管理较好的猪场发病率相对较低。
2．1．3 防疫情况 调查的36个规模化猪场都有防疫制度，但不规范，尤其是隔离、消毒、免疫程序不规范。种猪一般免疫接种猪瘟兔化弱毒疫苗、口蹄疫疫苗、伪狂犬病灭活苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活苗、猪传染性胃肠炎与流行性腹泻二联苗、链球菌苗等疫苗品种，细小病毒疫苗仅在后备母猪免疫一次。肉猪免疫接种猪瘟、口蹄疫、猪肺疫、链球菌等疫苗。
2．2 血清学检测结果
由表3可见，600头母猪血清中，阳性率依次为猪繁殖与呼吸综合征39．2％，猪瘟38．8％，猪细小病毒病38．5％，猪圆环病毒病32．5％，猪伪狂犬病28．8％，弓形虫病20．7％，附红细胞体病19．3％；而猪乙型脑炎病毒、衣原体、布鲁氏杆菌检测结果均为阴性。
3 讨论与小结
3．1 经流行病学调查结果证实，永州市所辖的11个县(区)36个规模化猪场均有母猪繁殖障碍性疾病，配种母猪受胎率为81．3％，有18．6％的妊娠母猪、36．1％的胎次发病，并以1胎母猪比例最大，占38．5％，出生时或1周内仔猪发病死亡率为14．8％。从检测结果看，乙型脑炎、衣原体病、布鲁氏杆菌病均呈阴性，永州市规模化猪场尚未感染；猪繁殖与呼吸综合征居首位，其他依次是猪瘟、猪细小病毒病、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病、猪弓形虫病、猪附红细胞体病，这是目前永州市规模化猪场母猪繁殖障碍性主要疾病，且流行广泛，发病率和感染率高，对永州市的养猪业构成了严重的威胁，造成了重大的经济损失。必须高度重视猪群的检疫和疫情监测，规范引种程序，健全猪场综合防疫体系，是今后提高猪场母猪繁殖性能的关键。
3．2 经检测，发现猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪伪狂犬病免疫抗体阳性率分别为39．2％、38．8％和28．8％，表明对这3种疾病的免疫工作有待加强，尤其是猪瘟，近年来常呈非典型性感染，尚需结合本地实际情况做好免疫工作，把好疫苗质量关，实行程序化免疫，经常对猪群整体免疫效果予以评价，提高猪群抗体水平，是有效控制猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟和猪伪狂犬病的关键技术环节。
3．3 本次检测重点是对母猪繁殖障碍危害较大的传染性疾病和寄生虫病，而造成母猪繁殖障碍的因素很多，如遗传因素、营养因素、管理不善等，还有待于进一步探讨。
