病毒所致的家禽肿瘤性疾病主要有马立克氏病、淋巴白血病和网状内皮细胞增生。目前,这三种病只有马立克氏病可以用疫苗来免疫预防。因此,预防家禽肿瘤病的措施主要是净化环境、净化鸡群,增强机体自身的抗病力和有效的马立克氏病疫苗免疫。
一、马立克氏病及免疫
1、马立克氏病病毒致病力不断增强,1998,在德国某些鸡场的某些白来航品系鸡中,用CVI988疫苗或CVI988+HVT双价苗二次免疫后,在20周龄及30周龄时的MD死亡率仍分别高达4.5%~1.8%及10.9%~21.3%。美国1999年下半年及2000年上半年分离到的MDV野毒株(Witter R L),CVI988/Rispens免疫后攻毒,保护率仅为70%!
2、马立克氏病疫苗的应用趋势:70年代使用HVT冻干苗,MD得到一定控制;80年代初以来,MDV野外毒力变异增强,HVT疫苗免疫失败频繁发生;90年代以来,CVI988/Rispens冷冻苗在世界各国应用最为广泛、免疫效力最好。
3、免疫剂量与抗强毒感染:国际公认1000PFU,并认为增加剂量和增加免疫次数均无必要,但随着MDV毒力增强和免疫失败的发生,使人们认为加大剂量会提高免疫效果,比较高的PFU含量会使抗体产生的时间和数量先于强毒。
梅里亚的单价CVI988噬斑含量为4000PFU,双价苗噬斑含量各为3000PFU以上,同时具备生产厂和中检所的检验报告。
4、关于多价疫苗:许多情况下,血清I型、 II型和III型MD苗单用时都不能抵抗超强毒的感染,但合并成二价或三价苗时就显示出协同作用,从而提供充分的保护力。有试验证明,实验鸡对MDV越易感,攻毒的MDV毒力越强,则MD二价苗的免疫协同作用越显著,这说明MD二价苗不仅免疫效力显著高于MD单价苗,而且能使免疫鸡群更好地抵抗MDV强毒、超强毒的致瘤作用,能使对MD高度易感的免疫鸡得到较好的保护,有效地克服MD单价苗免疫失败的现象。
5、关于胚胎免疫:在美国、以色列,胚胎免疫已经成为肉鸡、蛋鸡接种MD疫苗的主要方法,由于孵化规模大,每天出雏达25万~30万只,胚胎免疫效果确实、而且成本低廉。目前用于胚胎免疫的疫苗是HVT冻干苗,对于Ⅰ型和Ⅱ型是否有效,还需要进一步研究。
18日龄胚胎免疫比1日龄雏鸡免疫能更好地产生较好的免疫应答,并能更早地促进免疫器官的免疫成熟。18日龄鸡胚接种MD疫苗不仅能预防早期感染,还能有效的抑制羽囊排毒或延缓羽囊排毒的时间,这将大大减少MD对环境的污染,对防制MD有重要意义。胚胎接种HVT不会降低孵化率和健雏率。我国孵化场规模小,不论是购买或租用胚胎免疫接种机成本都比较贵。
6、肉仔鸡马立克氏病免疫的必要性:在我国白羽肉鸡MD免疫几乎是空白,肉仔鸡实际损失达0.5%以上,废弃率 达0.2%甚至更高,而美国的平均废弃损失仅为0.04%。患病鸡群饲料报酬降低,药费增加,造成直接经济损失。
在美国肉鸡全部要接种MD疫苗,即使是生长期只有60天的白羽肉鸡。因为MD不仅会造成肿瘤,形成肿瘤之前的病毒血症会对机体产生免疫抑制,使机体对接种的其他疫苗的免疫反应降低。此外,肉鸡如果不接种MD疫苗感染带毒,污染环境,肉、鸡蛋鸡混养时,蛋鸡易出现免疫失败。
7、关于二次免疫:尽管实验室的研究表明,马立克氏病的预防二次免疫并无必要,但是来自现场的大量数据证明二次免疫是有效的。MD的两次免疫首先从欧洲开始,目前意大利仍在实施。我国也有多次报道,临床具有一定效果。何秀珍(1997)用HVT对鸡群进行二次免疫,结果鸡群对MD的保护率提高了8.60%~12.25%。
对于经过长途运输或处在高污染地区的鸡只而言,雏鸡到达后再一次的MD疫苗补强接种是有效的。
马立克使病疫苗第二次免疫注射的时间为7-10日龄。
二、马立克氏病疫苗使用
1、 疫苗从液氮罐取出后在空气中暴露的时间在10秒钟之内;
在空气中暴露的时间对疫苗效价的影响
暴露时间疫苗效价
2.5分钟25%
5.0分钟3%
2、 马立克氏病液氮苗要求在27℃的温水中解冻;
用来解冻疫苗的水温对疫苗效价的影响
水温疫苗效价
27℃100%
18℃80%
40℃75%
3、 马立克氏病液氮苗要求在90~120秒内完成解冻;
马立克氏病液氮苗在解冻液中的解冻时间对疫苗效价的影响
水浴时间疫苗效价
30秒100%
5分钟83%
10分钟68%
15分钟47%
4、 稀释液要求保存在18℃~25℃的环境中;
稀释液的温度对疫苗效价的影响
温度疫苗效价
22 ℃100%
4 ℃78%
5、 马立克氏病疫苗解冻后要尽快稀释的稀释液中;
解冻后放置时间对疫苗效价的影响
放置时间疫苗效价的损失
5分钟17%
10分钟37%
15分钟57%
6、 马立克氏病疫苗稀释时要求冲洗安瓶2~3次;
冲洗对疫苗效价的影响
组别冲洗对照不冲洗试验
A100%92%
B100%74%
C100%92%
平均100%86%
7、 稀释后的疫苗要求在1小时内注射完毕;
接种疫苗时间对疫苗滴度的影响
组别2小时(对照)0.5小时(试验)
A100%115%
B100%104%
C100%107%
平均100%109%
8、 马立克氏病疫苗使用时避免随意添加其它药物;
添加抗生素对疫苗效价的影响
药物含量HVTCVI988
0hr1hr2hr0hr1hr2hr
庆大霉素0.5mg/0.2ml10063.457.910073.351.3
1.0mg/0.2ml10063.960.910041.336.5
恩诺沙星0.25mg/0.2ml1000010000
0.50mg/0.2ml1000010000
空白对照010079.666.710074.052.5
三、马立克氏病疫苗使用的注意事项
1、使用疫苗前要仔细检查疫苗外包装是否完好,破损疫苗禁止使用;
2、 稀释液瓶破损、浑浊、变色的应废弃;
3、 疫苗与瓶底分离的疫苗禁止使用;
4、 瓶尖有少许疫苗是灌装过程所致,不影响疫苗质量;
5、 疫苗浑浊是正常细胞团块所致,不影响疫苗质量;
6、 疫苗缓冻后颜色发红是正常PH值,不影响使用效果;
7、 禁止粗暴的取苗或把刚出罐的疫苗粗暴的丢到解冻的水盆里,因为-196℃的玻璃是非常脆弱的,容易破损;
8、 一瓶疫苗连接几个注射器时,连接管应呈Y型,而不要呈T型;
9、 在注意器具消毒的同时,也要注意环境和人员的消毒。许多注射感染是因此发生的;
10、每注射500~1000羽鸡雏更换一次针头;
11、每注射20万羽鸡雏更换注射器;
12、注射速度不宜过快,以1000~1500羽/小时为宜;
13、针头:抽苗至少12号,注射用7号短针头;
14、消毒剂不可直接接触稀释液或疫苗;
15、疫苗要完全融解后才可稀释;
16、慎防细胞沉降而致接种头份不均,注射过程中要求时常摇动疫苗瓶;
17、免疫后应对雏鸡进行检查,颈部羽毛湿润的应重新注射;
18、稀释和注射疫苗过程中要注意个人防护。