在养猪生产中,由于疾病的复杂和混合感染的普遍,经常运用实验室诊断试验评估猪群的健康状况,监测猪群对免疫接种的血清学反应,监测疾病控制与净化程序的进展和成效。
实验室的诊断试验结果在养猪生产中具有很重要的指导意义,但很多因素会对实验室诊断试验结果产生不同程度的影响,有时甚至产生与生产实际情况差距很大的情况,如不能正确运用实验室诊断结果指导生产,将在养猪生产中造成损失,有时甚至是不可挽回和影响深远的。
1 诊断试验结果的差异
造成诊断试验结果差异来自于实验(试验)和样本两个方面。
1.1 实验(试验)的差异
1.1.1 所有实验室的建立都是根据当时的历史条件及应用需要来建立的,实验室之间的试验条件并不是完全标准化,在不同的试验条件下,针对同一样本的检测结果很可能存在着差异。
1.1.2 人员的操作的差异
由于不同技术人员之间存在着专业水平和操作技术的差异,或同一技术人员在不同时间对试验结果的解释差异,甚至在试验中发生样本混淆、记录错误和样本交叉污染等情况都有可能造成结果的差异。
1.1.3 试剂盒的差异
在实验室诊断试验中,很多疾病的检测都是使用工业化生产的试剂盒,不同生产厂家所生产的试剂盒,由于在进行敏感性和特异性试验时所确定的临界值不是完全相同,故不同厂家生产的试剂盒所检测的结果也可能有差异。
由于感染猪和非感染猪的试验结果会有部分重叠,因此临界值的确定会影响检测结果。当降低临界值会提高敏感性,其代价是降低了特异性,检测结果中假阳性真阴性的猪只比例会增加,反之亦然。
作为SPF猪场因为需要保持SPF猪场的状态,那么高敏感性的试验是十分必要的。但若是阳性场为了净化某一特定病原而采用了高敏感性试剂盒,被淘汰猪只中假阳性真阴性的比例会增高,付出的代价就会较大。
2 样本的差异
感染猪的血清学反应情况取决于感染剂量,感染猪的临床情况,持续时间及其它并发感染等。
2.1 采样猪只状况
一般来说,采样进行实验室检测时,都是采取发生严重临床症状的猪只,值得注意的是,抗体水平最高时,并不一定是感染剂量最高的时候,所以应科学地确定采样的个体,采样个体应该具有典型的临床症状。
2.2 样本的制作、运输
2.2.1 采样部位
2.2.1.1 血液
大部分猪场采血时都是采耳静脉的血,这种方法的优点是简单易行,技术要求不高,缺点是易污染,时间长,血量少,为了减少因采血的污染造成检测结果的差异,建议使用真空采血管或一次性注射器进行前腔静脉采血。
2.2.1.2 组织
采组织样时,一定要根据准备检测病原的要求采样,部位要准确,而且要尽量做到无菌采样,否则也会造成结果差异。
2.2.2 样本的制作
不同的样本很容易在制作时造成交叉污染,这样也会造成结果差异,应使用一次性器具或经严格消毒的器具。
2.2.3 运输
应根据样本的防腐保存的具体要求分别使用甲醛、酒精、冻干或冷藏等方法进行保存,运输时应根据路途长短而确定包装方法、冰块的多少,防止样本变质。
3 综合评估实验室诊断试验结果
在养猪生产中,几乎所有的传染病都是由多种病因引起的,这也是猪场暴发传染病时比较难以控制,引起高死亡率的原因。在进行检测时可能会发现很多感染病原体同时存在,其实环境和管理因素在显露疾病的临床表现及确定疾病对生产性能的影响方面起到核心作用,因此在送检样本时,应明确试验的目的是为了证实或排除某种潜在的致病性病原,还是确定病原体在疾病过程中的作用。
在获得检测结果之后,应根据猪只临床状况和有关的传染病原和其它因素在疾病发生中所处的相对重要性来综合分析实验室的结果。
4 建议
由于获得的检测结果有可能会受到以上那么多因素的影响,为了取得对猪场有实际指导意义的检测结果,提出几点建议:
4.1 选择具有良好内、外部质量控制程序并具有丰富的做相关病原或试验工作的实验室,可一份样本送多个实验室,再在某一实验室做重复性试验,以期获得较为准确的结果。
4.2 采样之前与有关专家确定合适的样本来源、数量、类型及正确的送检方法。
4.3 明确送检目的。
4.4 获得检测结果时应考虑阳性试验结果和阴性试验结果的预测值。