活菌中药微生态在预防肉兔腹泻上的应用

         (哈尔滨中科   韩小米）

随着今年家兔及赖兔毛皮价格的持续上涨，兔子的养殖即将进入另一个新的高峰期。养殖的规模越大，兔病的爆发率就会越高，疾病危害也会日益增大。如何保证兔业的健康发展，我们一直在不断地探索和实践。

腹泻是危害肉兔养殖业的主要疾病，养殖场肉兔死亡有30%以上系腹泻病所致，一些技术储备不足的兔场，幼兔死亡率高达50%～70%，其中腹泻占到80%以上。肉兔腹泻不仅仅是中国养兔业的棘手问题，也是世界养兔业的技术难题之一。断奶幼兔腹泻死亡给企业造成了巨大的经济损失，也严重阻碍了养兔业的健康发展，是一个亟待解决的技术问题。肉兔肠道菌群紊乱是腹泻发生的主要原因，肉兔腹泻病主要表现为粪呈粥状或水样便，混有气泡、粘液及未消化物，肛周及后肢污染，病兔最终衰竭脱水死亡。

本研究使用活菌中药微生态微生态制剂“肠速康”调理肉兔肠道微生物菌群，采用“以菌制菌”的原则，试图发现一种新的行之有效的可完全替代抗生素的绿色添加剂，来预防养殖过程中的肉兔的腹泻。

1【实验方法】取断奶獭兔1000只（体重g），随机分为实验组和对照组，每组500只，每组4个重复；实验组四组日粮中分别添加0.1%、0.2%、0.25%、0.15%的中药微生态制剂“肠速康”，对照组不添加；两组饮水、免疫、日常管理无差异；每天记录各组动物死淘、腹泻发生情况；30d分别取实验与对照肉兔各12只（每个重复3只），剖检取肠道分别检测大肠杆菌总数、乳酸菌总数；小肠双糖酶含量；盲肠内容物氨态氮；肠道组织切片。其中活菌中药微生态制剂由哈尔滨中科生物工程有限公司提供。

1.1 腹泻率每天记录腹泻发生肉兔数量，腹泻判定标准为粪便松软不成球、牛粪样、水样；每只记为1头次；腹泻率=试验期腹泻肉兔头次数／(试验肉兔头数×试验天数)×100％。

1.2 肠道菌群总数取肉兔盲肠内容物，检测其中大肠杆菌总菌群数、乳酸菌涂板计数。

1.3 盲肠内容物氨态氮使用Weathburn方法

1.4 盲肠内容物微生物蛋白使用Zinn和Owens方法

1.5 小肠双糖酶麦芽糖酶/蔗糖酶法试剂盒

1.6 组织切片取十二指肠、小肠、盲肠各4~5cm，福尔马林固定48h，经复水、脱水、浸蜡、包埋制作石蜡切片，8μm连续切片，隔六取一，HE染色；显微镜观察肠绒毛变化。

2试验结果

2.1 腹泻率实验组平均死淘低于对照组9.4个百分点；腹泻肉兔数量显著少于对照组；腹泻率也显著低于对照；实验组在饲喂一周以后舍内氨气浓度显著低于对照；实验组吃软粪的次数显著减少，在兔舍内很难发现不成形粪便。对照组在一周以后腹泻情况明显上升。

表1 肉兔腹泻头次数及腹泻率

2.2 盲肠菌群总数实验组大肠杆菌总数量明显低于对照组，差异极显著（P＜0.01）；实验组乳酸杆菌含量极显著低于对照组（P＜0.01）

表2 肉兔盲肠大肠杆菌及乳酸杆菌数量

2.3 盲肠内容物氨态氮实验组盲肠内氨态氮含量极显著低于对照组（P＜0.01）

表3 肉兔盲肠内容物氨态氮含量

2.4盲肠内容物微生物蛋白实验组盲肠内容物中微生物蛋白含量极显著高于对照组（P＜0.01）

表4 肉兔盲肠内容物微生物蛋白含量

2.5 小肠双糖酶实验组小肠内麦芽糖酶和蔗糖酶酶活均极显著高于对照组。

表5 肉兔小肠双糖酶的酶活

2.6 组织切片实验组盲肠绒毛中细胞核数量显著多于对照组；小肠皱褶数目显著多于对照；十二指肠沟回深度大于对照。

1对照组盲肠微绒毛；2实验组盲肠微绒毛 HE ×100

3对照组小肠绒毛；4实验组小肠绒毛 HE ×40

5 对照组十二指肠；6实验组十二指肠 HE ×4

3讨论

    从实验和对照组的腹泻率来看活菌中药微生态制剂能有效的预防肉兔断奶后的腹泻，且能将腹泻率控制在一个理想的数值内，同时也在一定的程度上减少了肉兔因腹泻带来的死亡。

    肠道内大肠杆菌的过量繁殖是腹泻发生的一个主要原因，由表2我们可以看出使用活菌中药微生态制剂能将肉兔盲肠中大肠杆菌的数量控制在一个合适的范围，最重要的是能显著提高盲肠中乳酸杆菌的含量。

    当氮源缺乏时，微生物降解氨基酸供能，食糜中的氨态氮水平升高，同时氨基酸的代谢产物如：氨、硫化氢、酚类物质影响家禽健康，增加应激水平，氨态氮的下降说明实验组的肉兔抗应激能力显著高于对照（表3）。

    盲肠内容物的微生物蛋白水平高于对照说明实验组微生物总菌群的数量高与对照组，同时由表2可以得知肠道中大肠杆菌的数量低于对照，由此可知肠道中无害菌的含量明显高于对照，有利于肠道多种菌群之间的平衡，对生物多样性朝有益的方向发展提供前提。

    小肠中麦芽糖酶和蔗糖酶酶活均高于对照组说明实验组肉兔肠道对非淀粉多糖的吸收和利用显著好于对照，非淀粉多糖是日粮中的主要抗营养因子之一，很难被内源酶降解，同时增加肠道内食糜的黏度，降低饲料养分的消化吸收，易引起营养性腹泻，添加活菌中药微生态制剂可以显著提高动物对非淀粉多糖的消化吸收，从而减少腹泻的发生。

    从肠道的组织切片可以看出，活菌中药微生态制剂能显著刺激肉兔肠道的发育，肠绒毛中的细胞核数量显著多于对照组，且细胞核染色较深，说明细胞正处于活跃状态（图1、2）；从小肠绒毛的总体情况来看单位面积中实验组的小肠绒毛数量显著多于对照，且实验组绒毛的发育状况优于对照，有利于增加小肠和食糜的接触面积；实验组十二指肠的沟回明显多于对照组，可以显著提高对食糜的消化吸收能力。

    由此可见，活菌中药微生态制剂“肠速康”可以改善肉兔肠道菌群、减少大肠杆菌的含量、提高乳酸杆菌的含量、维护肠道生物多样性、提高肠道的非淀粉多糖酶的酶活、刺激肠绒毛的发育、改善肠绒毛结构，从菌群、分泌物、组织结构三个方面调理肠道对食糜的吸收从而减少腹泻的发生，且这些功能在养殖现场得到验证，说明活菌中药微生态制剂是肉兔养殖中控制腹泻的一个非常有效的途径。

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